丙戊酸钠对C6胶质瘤大鼠正常脑组织的放射保护作用

发布时间：2018-03-23 06:04

本文选题：丙戊酸钠　切入点：胶质瘤　出处：《山东大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的脑胶质瘤,亦称神经胶质细胞瘤,是神经系统最常见的原发性肿瘤,因具有顽固性、易局部播散和复发等特点,预后极差。目前,放射治疗已成为脑胶质瘤术后的主要辅助治疗方式之一。然而,放射治疗在治愈或控制肿瘤时的剂量与引起正常组织损伤剂量之间的梯度较小。为了提高肿瘤放疗疗效,一方面可通过三维适形放疗减少正常组织的受量,同时加大肿瘤放疗剂量；另一方面也可通过改善肿瘤的放射敏感性,来增强放射线的杀伤力。放射治疗中在控制肿瘤的同时最大限度地减少对正常组织的损伤,是我们目前所面临的一个重大挑战。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors, HDACIs)作为新一代的抗肿瘤药物,近来有研究发现,HDACIs作为放射保护剂可以减轻正常组织的辐射损害。丙戊酸钠(valproic acid, VPA)由于其作用缓和、低毒性,被广泛应用于脑肿瘤患者的抗癫痫治疗。目前体内外实验发现VPA作为HDACIs可以增强脑肿瘤的放射敏感性,但是其作为放射保护剂的研究较少。本研究选取VPA作为研究对象,通过观察VPA对C6胶质瘤大鼠正常脑组织的放射保护作用,为VPA作为放射保护剂在胶质瘤放疗中的应用提供实验依据。方法体外常规培养C6细胞,种植于Wistar大鼠右侧尾状核,一周后MRI确认C6大鼠胶质瘤模型是否建立成功。48只荷瘤大鼠随机分为4组(n=12),即对照组、VPA组、放疗组及联合组。对照组给予假照射和注射生理盐水；VPA组给予假照射和注射VPA (150mg/kg),5天；放疗组给予单次剂量为3Gy X线照射5天和注射生理盐水；联合组给予单次剂量为3Gy X线照射5天和注射VPA (150mg/kg),5天。放疗结束后24h,四组各取6只大鼠给予4%多聚甲醛心脏灌注处死,免疫组化检测荷瘤大鼠肿瘤对侧正常脑组织Caspase-3的表达水平来观察细胞凋亡情况；记录剩余4组(n=6)大鼠的生存期。24只正常大鼠同上随机分为四组,接受对应的相同处理。记录正常大鼠自VPA注射之日开始2周内每日体重变化。放疗结束后6个月,大鼠4%多聚甲醛心脏灌注处死,电镜观察正常脑组织血管壁、神经元细胞核、突触结构及数目改变。结果MRI显示C6大鼠胶质瘤模型建立成功。免疫组化结果示放疗组相较于联合组肿瘤对侧脑组织在细胞核上可见明显的Caspase-3表达,Caspase-3的表达定位于细胞核内,为棕黄色染色。VPA组、放疗组及联合组大鼠生存期较对照组(17d)延长,其中位生存期分别为19d、23d、28d。联合组与放疗组大鼠生存期存在明显差别(p0.05),同时联合组存在长期幸存大鼠(50d)。自放疗开始后,放疗组与联合组大鼠体重存在明显差别(p0.05),且与其余3组相比较放疗组体重存在明显下降趋势。放疗期间联合组相较于放疗组存在一个相对稳定的体重缓慢增长趋势。放疗结束后,联合组及放疗组均存在体重上升趋势。电镜结果示放疗组血管壁出现严重的结构紊乱及不规则增厚,以及玻璃样变性和纤维变性等改变。联合组可见白质中部分毛细血管内皮细胞局部肿大,同时在不规则的管腔见毛细血管内皮细胞轻度肿大。然而在对照组及VPA组中可见正常血管壁。放疗组神经元核膜表面凹凸不平及不规整,甚至有损伤。然而联合组神经元核膜表面轻度不规整,没有损伤。对照组及VPA组示神经元核膜正常。电镜观察联合组突触结构尚清晰、数量多,放疗组突触结构不完整、数量减少。结论VPA对C6胶质瘤大鼠的正常脑组织存在放射保护作用,其中抑制放射所致的正常细胞凋亡发挥了重要作用。VPA联合放疗可显著延长C6胶质瘤大鼠的生存期,考虑与VPA发挥了保护正常脑组织作用有关,同时VPA增强了肿瘤细胞放射敏感性也起着重要作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.41

【参考文献】