植酸对多巴胺能神经元保护作用机制的研究
本文选题：植酸 + 帕金森病 ； 参考：《青岛大学》2016年硕士论文
【摘要】：目的:研究植酸(Phytic acid,PA)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞模型中细胞活力、胞浆内游离钙离子浓度变化、多巴胺转运蛋白DAT含量、β-链蛋白(β-catenin)和糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)表达、突触囊泡循环的影响。探讨植酸通过Wnt/β-catenin信号通路和突触囊泡循环作用对MPTP诱导的帕金森细胞模型多巴胺能神经元的可能的保护作用机制。方法:通过体外培养SH-SY5Y细胞,经PA预处理,MPTP诱导细胞建立帕金森病细胞模型,通过MTT比色法检测细胞活性以分析PA的神经保护作用,用钙离子荧光探针Fura-2/AM测定PA对胞浆内游离钙离子浓度变化的影响,用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测多巴胺转运蛋白DAT的表达,通过实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光分析β-catenin和GSK-3β的表达,用FM1-43探针通过突触囊泡循环作用分析PA预处理对细胞的影响。结果:MTT结果表明,PA预处理能够剂量依赖性的减弱MPTP诱导的细胞凋亡和细胞损伤;通过Fura-2/AM荧光探针检测表明PA能够减少MPTP诱导的胞内游离钙离子水平的增加;Western blot分析显示,PA可以使多巴胺转运蛋白(DAT)表达量显著上调;实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光结果表明,PA能够激活SH-SY5Y细胞内Wnt/β-catenin信号通路的标志物的表达水平。此外,通过FM1-43探针检测表明,与MPTP诱导的荧光强度减弱相比,PA使标记囊泡作用的荧光强度增强,多巴胺能神经元数量增多。结论:50、150、300?mol/L植酸能够对MPTP诱导的多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用,其机制可能与激活突触囊泡循环和Wnt/β-catenin信号通路相关联有关,为PD的预防和治疗开辟了新的方向。
[Abstract]:Objective: to study the effects of phytic acididopa on the cytoplasmic free calcium concentration and cell viability in Parkinson's neuroblastoma (SH-SY5Y) cells induced by 1-methyl-4-phenyl-1-trihydropyridine (MPTP).The content of dopamine transporter DAT, the expression of 尾 -catenin and glycogen synthase kinase 3 尾 -GSK-3 尾, and the effect of synaptic vesicle circulation.To investigate the possible protective mechanism of phytic acid on dopaminergic neurons induced by MPTP in Parkinson's cell model through Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway and synaptic vesicle circulation.Methods: SH-SY5Y cells were cultured in vitro and induced by PA. The cell model of Parkinson's disease was established. The cell activity was measured by MTT colorimetry to analyze the neuroprotective effect of PA.The effect of PA on intracellular free calcium concentration was measured by Fura-2/AM and the expression of dopamine transporter DAT was detected by Western blotting.The expression of 尾 -catenin and GSK-3 尾 was analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR and cellular immunofluorescence. The effect of PA pretreatment on the cells was analyzed by using FM1-43 probe through synaptic vesicle circulation.Results the cell apoptosis and cell damage induced by MPTP could be attenuated in a dose-dependent manner.Fura-2/AM fluorescence probe assay showed that PA could reduce the increase of intracellular free calcium level induced by MPTP. Western blot analysis showed that PA could significantly up-regulate the expression of dopamine transporter.The results of real-time fluorescence quantitative PCR and cellular immunofluorescence showed that SH-SY5Y could activate the expression of Wnt/ 尾 -catenin markers in SH-SY5Y cells.In addition, FM1-43 probe detection showed that the fluorescence intensity of labeled vesicles was enhanced and the number of dopaminergic neurons increased compared with the decrease of fluorescence intensity induced by MPTP.Conclusion phytic acid can protect dopaminergic neurons from injury induced by MPTP. The mechanism may be related to the activation of synaptic vesicle circulation and Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway, which opens a new direction for the prevention and treatment of PD.
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R742.5
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 盛文利,朱良付,曾进胜,黄如训;杂种多巴胺能神经元细胞系的体外分化和形态学特征[J];中国神经精神疾病杂志;2004年01期
2 陈梅玲;沈岳飞;;影响多巴胺能神经元体内外分化的因素[J];基础医学与临床;2008年04期
3 范东艳;王苹;刘然;牛凤兰;杜波;;小胶质细胞活化刺激骨髓间充质干细胞释放胶质细胞源性神经营养因子保护多巴胺能神经元的实验[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年06期
4 夏立平;李凌云;费喜峰;梁中琴;;自噬参与6-羟基多巴胺诱导多巴胺能神经元死亡的实验观察[J];南方医科大学学报;2010年12期
5 王大力;赵鹏;刘强;王彦;赵辉;彭延波;杜利清;;脂多糖诱导小胶质细胞活化对多巴胺能神经元的损伤作用[J];中华临床医师杂志(电子版);2012年08期
6 牛平,吕永利,王耀山,何祥;碱性成纤维细胞生长因子对体外培养多巴胺能神经元营养作用[J];中国医科大学学报;2001年06期
7 张文华,王晓民,杨扬,薛冰,崔振中,吴承远,韩济生;人胶质细胞源性神经营养因子基因工程细胞保护多巴胺能神经元的实验研究[J];中华医学杂志;2001年22期
8 李庆国,林志国,刘恩重,戴钦舜;神经干细胞向多巴胺能神经元分化的条件[J];中华神经外科杂志;2002年02期
9 姜晓兵,赵洪洋,周凤,刘如恩,周伟,张建国;稳定表达GDNF/EGFP融合基因的骨髓基质干细胞对多巴胺能神经元的保护作用[J];中国神经科学杂志;2004年05期
10 胡琦;康慧聪;刘晓艳;许峰;朱遂强;;骨髓间充质干细胞体外分化为多巴胺能神经元的实验研究[J];神经损伤与功能重建;2006年04期
相关会议论文 前10条
1 张艳新;李军泉;徐群渊;;炎症因素与黑质多巴胺能神经元选择性变性相关性研究[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年
2 刘彬;谢俊霞;;雌激素及白凤丸对中枢多巴胺能神经元的调节和保护作用[A];中国生理学会张锡钧基金会第八届全国青年优秀生理学学术论文综合摘要[C];2003年
3 汪锡金;叶民;张宇红;陈生弟;;白细胞介素-10抑制促炎因子生成保护多巴胺能神经元[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
4 周爱霞;杨慧;;野生型α-synuclein过表达对大鼠多巴胺能神经元的影响[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年
5 郑超;汪萌芽;Jie WU;;κ-阿片受体对大鼠腹侧被盖区多巴胺能神经元自发放电的差异性调节作用[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年
6 董晓莉;谢俊霞;;雌激素和类雌激素对杏仁核多巴胺能神经元功能的影响[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年
7 张振涛;曹学兵;孙圣刚;王岚;乔娴;刘红进;;蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元重启细胞周期的作用及机制[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
8 李宝园;丰玲;王雁春;郭敏芳;马存根;;睾丸支持细胞诱导大鼠神经干细胞向多巴胺能神经元分化作用研究[A];2008年神经内分泌暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
9 王国权;赵忠新;赵瑛;;褪黑素对多巴胺能神经元的保护作用[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
10 胡琦;康慧聪;刘小艳;许峰;朱隧强;;骨髓间充质干细胞分化为多巴胺能神经元的实验研究[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
相关重要报纸文章 前1条
1 张中桥;培补肝肾药可保护多巴胺能神经元[N];中国医药报;2005年
相关博士学位论文 前10条
1 方伟;多巴胺能神经元轴突变性在MPTP诱导的帕金森病模型中的作用研究[D];第四军医大学;2015年
2 王馥丽;神经毒素特异损伤的多巴胺能神经元与免疫细胞相互作用研究[D];北京理工大学;2015年
3 陈锐;DDIT4在甲基苯丙胺介导的神经毒性及心脏毒性中的作用[D];南方医科大学;2016年
4 王晶;人类胚胎干细胞诱导分化为多巴胺能神经元的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
5 赵鹏;外源多巴胺对α-Synuclein过表达多巴胺能神经元的影响[D];天津医科大学;2009年
6 盛超;小鼠体细胞向多能性神经前体细胞和成熟多巴胺能神经元的直接转分化[D];东北农业大学;2012年
7 姚谦明;鼠骨髓源神经干细胞向多巴胺能神经元定向诱导分化[D];第一军医大学;2006年
8 何秀全;罗格列酮通过抑制小胶质细胞活化而保护多巴胺能神经元的研究[D];山东大学;2012年
9 钟善传;α-SYN和EN1在小鼠的发育学表达及其在PD模型中作用的实验研究[D];第三军医大学;2010年
10 贾晓晶;帕金森氏病体外细胞模型的建立及胞二磷胆碱对多巴胺能神经元保护作用的研究[D];吉林大学;2004年
相关硕士学位论文 前10条
1 梁小凤;6-羟基-1-氢-吲唑对MPTP帕金森病模型小鼠的保护作用[D];南方医科大学;2015年
2 相恒伟;Ndfip1对多巴胺能神经元的保护作用[D];青岛大学;2015年
3 付波;中脑腹侧被盖区多巴胺能神经元参与抑郁发生的机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年
4 徐瑞;MiR-133b对帕金森病多巴胺能神经元模型轴突变性的影响[D];青岛大学;2016年
5 王月华;植酸对多巴胺能神经元保护作用机制的研究[D];青岛大学;2016年
6 吕立;顺序性化学诱导促大鼠骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元分化治疗帕金森的实验研究[D];南京医科大学;2010年
7 高健;神经胶质源性神经营养因子和白细胞介素-1α促进大鼠骨髓基质细胞诱导分化为多巴胺能神经元的实验研究[D];第一军医大学;2006年
8 徐晓帆;黄芩茎叶总黄酮对多巴胺能神经元的保护作用[D];泰山医学院;2014年
9 刘晶;榆紫叶甲Ambrostoma quadriim-pressum脑内多巴胺能神经元的免疫组织化学定位研究[D];东北师范大学;2010年
10 范瑞芳;骨髓间充质干细胞体外定向分化为多巴胺能神经元的实验研究[D];广西医科大学;2009年
，本文编号：1736006
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/1736006.html
