MC1568对脑出血大鼠的神经保护作用及其机制的研究

发布时间：2018-04-13 17:10

  本文选题：脑出血 + HDACs　； 参考：《华中科技大学》2015年博士论文

【摘要】：第一部分大鼠脑出血过程中HDAC各亚型的表达变化 目的观察脑出血大鼠脑组织中各种HDAC亚型的表达变化,从而明确参与脑出血损伤的病理过程的HDAC亚型 方法采用Ⅳ型细菌性胶原酶定向注射诱导大鼠大脑i基底节出血模型,通过HE染色进行病理形态学观察,然后通过实时荧光定量PCR技术分别检测脑出血后3、6、12、24、48小时及假手术组大鼠脑组织内各种HDACmRNA水平变化,免疫蛋自印迹技术检测HDAC蛋白水平变化,免疫荧光技术对其进行细胞类型鉴别及亚细胞定位 结果HE染色可见大鼠右侧尾状核区形成了类圆形血肿,血肿内组织疏松,可见大量空泡,神经细胞明显减少,血肿周围区域可见较多红细胞和炎性细胞浸润；假手术组和脑出血组大鼠脑组织内11类亚型的HDAC均有表达,且与假手术组相比,脑出血组HDAC4、HDAC5和HDAC7mRNA表达水平增高,而HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC6、HDAC8、 HDAC9、HDAC10、HDAC11mRNA表达水平无明显差异：脑出血组HDAC4和HDAC5蛋白水平较假手术组明显升高,而两组HDAC7蛋白表达量则无明显变化；经免疫荧光双标发现HDAC4和HDAC5均主要于神经元表达,且同时存在于细胞核和细胞浆。 结论细菌性胶原酶定向注射成功建立稳定的大鼠右侧纹状体出血模型；HDAC1-11在正常脑组织和出血脑组织中均有表达,而脑出血仅诱导了HDAC4和HDAC5在mRNA和蛋白水平表达增多,且表达HDAC4和HDAC5的细胞类型主要是神经元,表明二者很可能在脑出血性损伤形成过程中有着重要的调控作用。 第二部分MC1568对脑出血大鼠的神经保护作用 目的观察MC1568对脑出血损伤大鼠的神经保护作用 方法Ⅳ型细菌性胶原酶成功诱导大鼠脑出血后,将其分为MC1568组和生理盐水组,分别给予MC1568和生理盐水(25mg/kg,每天两次,腹腔注射)三天,于脑出血后1天、3天、7天、14天和28天分别对其进行神经功能评分和头颅磁共振扫描,第3天分别通过干湿重法和TUNEL法评估大鼠脑组织水含量和神经细胞凋亡情况。 结果与生理盐水组比较,MC1568组大鼠改良的神经功能严重程度评分在脑出血后7、14和28天均明显降低,而第1和3天的评分则无明显差异；血肿体积在第1天两组无差异,第3天MC1568组血肿体积明显缩小：两组的脑组织水含量无明显差异；脑出血后第28天MC1568组脑组织损失百分比较生理盐水组小；MC1568组大鼠血肿周围区域TUNEL阳性细胞数较生理盐水组减少。 结论MC1568抑制了脑出血大鼠血肿扩大,减少神经细胞凋亡,减少了出血后脑组织的损失,从而减轻了神经功能损伤,表明MC1568对脑出血诱导的原发性和继发性损伤具有明显的保护作用。 第三部分MC1568对脑出血大鼠的神经保护作用的机制 目的在分子水平上初步探讨MC1568对脑出血的保护作用的机制 方法细菌性胶原酶成功诱导大鼠脑出血模型,分别给予MC1568和生理盐水,通过实时荧光定量PCR检测脑组织内凋亡因子caspase-3和bcl-2、炎症因子MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平,免疫蛋白印迹技术检测caspase-3、bcl-2、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平,TUNEL法检测脑组织内细胞凋亡情况。 结果与生理盐水组比较,MC1568组大鼠脑组织内caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β的mRNA水平明显降低,bcl-2mRNA水平则升高,caspase-3、MMP-9、TNF-α、IL-1β蛋白水平也相应降低,bcl-2蛋白表达含量增加,血肿周围区域TUNEL阳性细胞数目减少。 结论MC1568对脑出血的神经保护作用可能一方面通过减少MMP-9、TNF-α、IL-1β炎症因子的分泌进而抑制炎症反应实现；另一方面则通过调节caspase-3、bcl-2凋亡因子的表达来抑制神经细胞凋亡从而减轻脑出血性损伤。
[Abstract]:Changes of the expression of HDAC isoforms in the first part of rats with intracerebral hemorrhage

Objective To observe the expression of various HDAC subtypes in brain tissue of intracerebral hemorrhage rats .

Methods The rat brain i basal ganglia hemorrhage model was induced by directional injection of type 鈪，

本文编号：1745429