miRNA-320a通过靶向水通道蛋白4抑制神经胶质瘤细胞U251迁移侵袭的分析

发布时间：2018-07-05 10:18

  本文选题：MiRNA-a + 水通道蛋白　； 参考：《基因组学与应用生物学》2017年01期

【摘要】：本研究初步探讨过表达miRNA-320a对抑制神经胶质瘤U251细胞迁移、侵袭的可能的机制。实验开始前我们利用生物信息学软件进行分析对比miRNA-320a与水通道蛋白4(AQP4)之间的靶点结合关系,然后我们用miRNA-320a mimic及Ncontrol对U251细胞株进行转染,48 h后进行下一步实验。首先用q-PCR验证过表达转染情况,以及水通道蛋白4(AQP4)m RNA的表达水平,其次用划痕和Transwell检测转染后细胞株的迁移侵袭能力,最后用Western blotting测定AQP4的表达水平。生物信息分析可得miRNA-320a在AQP4 m RNA 3'UTR区域能稳定结合,实验结果显示转染mimic后,过表达组明显升高,且过表达组AQP4 m RNA的表达明显被抑制,划痕和Transwell实验提示了过表达miRNA-320a后能抑制U251细胞株的迁移侵袭能力(p0.01)。Western blotting结果显示,过表达miRNA-320a与对照组相比能明显抑制AQP4蛋白的表达。所有研究结果提示miRNA-320a能靶向作用AQP4 m RNA 3'UTR区域,并抑制其蛋白表达,从而抑制了肿瘤细胞U251的迁移侵袭能力,为临床治疗恶性胶质瘤提供新的参考。
[Abstract]:In this study, we investigated the possible mechanism of overexpression of miRNA-320a in inhibiting the migration and invasion of glioma U251 cells. Before the experiment, we used bioinformatics software to analyze and compare the target binding relationship between miRNA-320a and aquaporin 4 (AQP4), then we transfected U251 cell line with miRNA-320a mimic and Ncontrol for 48 h. The expression of aquaporin-4 (AQP4) mRNA and the expression of aquaporin-4 (AQP4) mRNA were detected by q-PCR, then the migration and invasion ability of transfected cells was detected by scratch and Transwell, and the expression of AQP4 was detected by Western blotting. Bioinformatics analysis showed that miRNA-320a could bind stably in the region of AQP4 mRNA 3 UTR. The results showed that after transfection of mimic, the expression of AQP4 mRNA in overexpression group was significantly increased, and the expression of AQP4 mRNA in overexpression group was significantly inhibited. The results of scratch and Transwell experiments showed that overexpression of miRNA-320a could inhibit the migration and invasion of U251 cell line (p0.01). Western blotting showed that overexpression of miRNA-320a could significantly inhibit the expression of AQP4 protein. All the results suggest that miRNA-320a can target AQP4 mRNA 3UTR and inhibit its protein expression, thus inhibiting the migration and invasion of tumor cell U251, and providing a new reference for clinical treatment of malignant glioma.
【作者单位】： 重庆医科大学基础医学院组织细胞工程与干细胞研究室;重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心;
【基金】：国家自然科学基因项目(31271368)基金资助
【分类号】：R739.41

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