缺氧缺血性脑损伤新生大鼠松果体miRNA-182及Clock mRNA的表达变化
本文选题：miRNA + miRNA- ； 参考：《中国当代儿科杂志》2016年03期
【摘要】：目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后松果体内小RNA(miRNA)的差异表达,研究其在HIBD导致的昼夜节律紊乱中的作用。方法将7日龄的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为HIBD模型组和假手术组,根据Rice-Vannucci法制作HIBD模型,24h后分别取两组松果体组织,通过miRNA芯片检测及实时荧光定量PCR法(RT-PCR)筛选出HIBD后高表达的miRNA,测定其在各组织(肺、肠、胃、肾、大脑皮层、松果体组织)中的表达差异。利用RT-PCR技术分别测定两组在缺氧缺血后0、24、48、72h松果体中高表达miRNA及靶基因Clockm RNA的表达变化。结果 miRNA芯片结果结合RT-PCR技术筛选出多个和HIBD相关的miRNA,其中miRNA-182表达差异明显。miRNA-182在松果体组织中高丰度表达。HIBD后24h、48hmiRNA-182的表达水平高于对应时间点的假手术组(P0.05);与对应时间点的假手术组相比,HIBD后0hClockm RNA表达水平升高,48h时降低,72h后明显升高(P0.05)。结论 miRNA-182可能参与了HIBD后昼夜节律紊乱的病理生理过程。
[Abstract]:Objective to observe the differential expression of small RNA (miRNA) in pineal gland after hypoxic-ischemic brain injury (HIBD) in neonatal rats and to study its role in circadian rhythm disorder induced by HIBD. Methods 7-day-old Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into two groups: HIBD model group and sham operation group. The high expression miRNAs after HIBD were screened by miRNA microarray detection and real-time fluorescent quantitative PCR (RT-PCR), and the difference of miRNAs expression in different tissues (lung, intestine, stomach, kidney, cerebral cortex, pineal tissue) was determined. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of miRNA and Clockm RNA in pineal gland at 72 h after hypoxia ischemia. Results multiple miRNAs associated with HIBD were screened by miRNA microarray and RT-PCR. The expression level of miRNA-182 in pineal tissue was significantly higher than that in sham-operation group at 24 h after HIBD (P0.05), and the expression level of miRNA-182 in pineal tissue was significantly higher than that in sham operation group (P0.05). The expression level of Clockm mRNA in sham operation group was significantly lower than that in HIBD group at 0 h after HIBD for 48 h and 72 h after HIBD (P0.05). Conclusion miRNA-182 may be involved in the pathophysiological process of circadian rhythm disorder after HIBD.
【作者单位】： 苏州大学附属儿童医院新生儿科;
【基金】：国家自然科学基金(81271378,81471488)
【分类号】：R742
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，本文编号：2101996
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