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大鼠局灶性脑缺血再灌注后大脑皮质神经元自噬的研究

发布时间:2018-08-05 12:22
【摘要】:目的检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮质神经元的损伤及自噬情况,并初步探讨自噬在脑缺血损伤过程中的作用。方法用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,实验动物随机分为:假手术组(Sham组)和大脑中动脉栓塞再灌注组(MCAO组)。HE染色检测大鼠皮质神经细胞损伤。免疫荧光双标记法检测皮质神经元及星形胶质细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达水平。结果与Sham组比较,大鼠脑缺血再灌注后,皮质神经细胞损伤严重;LC3/Neu N和Beclin-1/Neu N双标阳性细胞数显著增加(P0.05),二者分别占LC3和Beclin-1单标阳性细胞数的比例均接近100%,未发现LC3/GFAP和Beclin-1/GFAP双标阳性细胞,说明LC3和Beclin-1主要表达于神经元。结论脑缺血再灌注可能主要通过增加LC3、Beclin-1蛋白表达水平激活皮质神经元内的自噬。
[Abstract]:Objective to detect the injury and autophagy of cortical neurons after focal cerebral ischemia reperfusion in rats and to explore the role of autophagy in the process of cerebral ischemia injury. Methods the rat model of focal cerebral ischemia reperfusion was established by thread embolization. The experimental animals were randomly divided into sham-operated group (Sham group) and middle cerebral artery embolization reperfusion group (MCAO group) .HE staining was used to detect cortical nerve cell injury in rats. The expression of autophagy associated protein LC3 / Beclin-1 in cortical neurons and astrocytes was detected by immunofluorescence double labeling method. Results compared with Sham group, after cerebral ischemia reperfusion in rats, The number of double labeled positive cells of LC3 / Neu N and Beclin-1/Neu N increased significantly (P0.05), the proportion of them to the number of LC3 and Beclin-1 single labeled positive cells were close to 100.No double labeled positive cells of LC3/GFAP and Beclin-1/GFAP were found, indicating that LC3 and Beclin-1 were mainly expressed in neurons. Conclusion Cerebral ischemia-reperfusion may activate autophagy in cortical neurons by increasing the expression of LC3 and Beclin-1 protein.
【作者单位】: 天津医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81373003) 中国博士后科学基金资助项目(2014M550148)
【分类号】:R743.3

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