异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）在脑胶质瘤中的表达及意义

发布时间：2018-12-09 18:27

【摘要】：目的：通过对WHOII-III级胶质瘤组织中异柠檬酸脱氢酶同工酶1(Isocitrate Dehydrogenase IDHl)的正常酶活性及酶蛋白含量的测定来探讨胶质瘤中IDH1基因突变表达的作用机制。 方法：56例人脑胶质瘤组织标本取自于2012年7月至2013年12月河北医科大学第二医院神经外科手术标本，病理诊断由医院病理科按WHO脑肿瘤分类分级标准（2007年）进行，其中星形细胞瘤(II级)10例，少突胶质细胞瘤(II级)12例，少突星形细胞瘤(II级)5例，，间变型星形胶质细胞瘤(III级)15例，间变形少突胶质细胞瘤(III级)14例。另外取脑外伤开颅术中正常脑组织（额叶及颞叶）5例作为对照。所有肿瘤标本及正常脑组织标本均快速入液氮中-80℃冻存。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay ELISA）方法中的双抗体夹心法检测所有标本组织IDH1正常酶活性。将以上标本为3组：正常脑组织组、II级胶质瘤组和III级胶质瘤组。采用蛋白质印迹法（Western Blot）同时测定3组标本IDH1酶蛋白含量，得出相应标本代表蛋白含量的灰度值，采用SPSS13.0进行统计分析。 结果： 1酶活性 采用ELISA法对实验标本进行酶活性值检测。以正常脑组织组酶活性值范围为标准，将所有肿瘤组织酶活性值分为低活性组和高活性组，数值以均数±标准差表示，结果显示：正常脑组织组（n=5）为80.297±3.357;低活性组（n=35）为48.755±6.837;高活性组（n=21）为132.246±14.887。将以上三组两两比较，均具有统计学意义（P0.05）。低活性组肿瘤例数为35，约占总肿瘤例数的62.5%。 2酶含量 采用Western Blot法对标本进行酶蛋白含量测定。数值以均数±标准差表示，正常脑组织组(n=5)：0.2609±0.0653, II级胶质瘤（n=27）：0.4577±0.8321, III级胶质瘤（n=29）：0.7110±0.0774。以上三组两两比较，均具有统计学意义（P0.05）。 3酶活性与酶蛋白含量相关性分析 采用Pearson计算相关分析，II级胶质瘤相关系数0.009；III级胶质瘤相关系数0.201；所有II、III级肿瘤相关系数0.071，酶活性大小与酶含量多少相关性不明显。 结论: 1与正常对照组相比，脑胶质瘤组中IDH1正常酶活性存在明显差异，活性低于正常的占62.5%，高于正常的占37.5%。结果与目前相关亚型胶质瘤研究IDH1基因突变率相当，存在IDH1正常酶活性降低的胶质瘤中可认为含有IDH1基因突变。 2与正常对照组相比，胶质瘤组织中IDH1酶蛋白含量明显增高，且所测胶质瘤中，II级肿瘤IDH1酶蛋白含量较III级肿瘤更高。酶蛋白表达与肿瘤级别相关，提示肿瘤的恶性水平在一定程度上影响着IDH1酶蛋白的含量。 3胶质瘤组织中，无论IDH1正常酶活性的高低与酶蛋白含量多少并无明显相关联系，提示虽然IDH1变异基因表达降低了IDH1正常酶活性，但并不能确定是IDH1酶蛋白含量的决定性因素，说明肿瘤组织在IDH1基因表达上存在着各方面复杂的调控机制。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of IDH1 gene mutation expression in WHOII-III grade glioma by measuring the normal enzyme activity and the protein content of isocitrate dehydrogenase isozyme 1 (Isocitrate Dehydrogenase IDHl). Methods: from July 2012 to December 2013, 56 cases of human glioma were collected from neurosurgical department of the second Hospital of Hebei Medical University. The pathological diagnosis was performed by the Department of Pathology of the Hospital according to the WHO criteria for classification and grading of brain tumors (2007). There were 10 cases of astrocytoma (II grade), 12 cases of oligodendrocytoma (II grade), 5 cases of oligodendrocytoma (II grade), 15 cases of anaplastic astrocytoma (III grade) and 14 cases of anaplastic oligodendrocytoma (III grade). In addition, 5 cases of normal brain tissue (frontal lobe and temporal lobe) during craniotomy were taken as control. All tumor specimens and normal brain tissues were rapidly frozen at-80 鈩

本文编号：2369837