红曲素干预对脑出血后大鼠脑损伤的影响

发布时间：2019-08-08 18:14

【摘要】：目的:观察不同剂量组红曲素干预对实验性脑出血大鼠不同时间点病灶处的血肿体积及脑水肿体积的变化,同时观测不同剂量组红曲素干预对大鼠神经功能学评分、脑水含量、血肿量及血脑屏障通透性的影响,探讨红曲素对急性脑出血大鼠是否有脑保护作用,并进一步筛选出干预治疗的最佳剂量。方法:选取164只雄性SD大鼠。随机分为假手术组、脑出血模型组、红曲素低剂量治疗组(1 mg/kg/day)、红曲素中剂量治疗组(5 mg/kg/day)、红曲素高剂量治疗组(10 mg/kg/day)。各组按照实验术后出血时间点不同再次分为1 d、3 d、7 d三个亚组。IV型胶原酶制备脑出血。造模成功后6小时即开始灌胃红曲素,同时假手术组及脑出血模型组灌胃等量生理盐水。术后每组6只用于各观察时间点的功能缺损评分及连续MRI成像。通过T2*WI、SWI评估病灶处的血肿体积,T2 WI、T2 Flair用于脑水肿体积的评估。待第7 d核磁成像及行为学评分完成后处死大鼠,收集第7 d亚组的脑组织标本行血脑屏障通透性及血红蛋白含量测定。各组的剩余大鼠用于第1 d、3 d两个亚组标本的收集,进行western blot、脑水含量、血红蛋白含量及血脑屏障通透性的测定。结果:(1)脑出血早期PPARγ、Nrf2即被激活,同时与ICH模型组相比红曲素高剂量组干预后可见在第1-3 d的PPARγ及Nrf2蛋白含量明显增加(P0.05)。(2)与假手术组相比,脑出血后1 d即可见明显血肿及神经功能损害(P0.05);红曲素高剂量治疗组的大鼠神经行为学评分在第1-7 d均显著高于脑出血模型组,血肿含量明显降低(P0.05);红曲素中剂量组在第3-7 d可见评分高于脑出血组、血肿量低于出血组,但差异不如高剂量组显著。(3)ICH后第1-3 d,红曲素高剂量治疗组的大鼠脑水含量较脑出血组显著减轻(P0.05),中剂量红曲素干预后可见第3 d的脑水肿含量低于脑出血组(P0.05)。(4)大鼠的血脑屏障通透性在脑出血后显著破坏,脑内伊文思蓝含量较假手术组相比明显增加(P0.05)。但给予高体重剂量红曲素干预后,可见术后伊文思蓝含量在第1-3 d较脑出血模型组降低(P0.05)。(5)头颅核磁成像显示同血肿量及脑水含量测定结果一致,红曲素高剂量组可显著减少出血后第1-7 d的血肿体积及第1-3 d的血肿周围水肿体积(P0.05);红曲素中剂量治疗组可减少第3-7 d的脑血肿体积及第3 d的脑水肿体积(P0.05);而红曲素低剂量治疗组干预后与脑出血模型组在各观察时间点的血肿及水肿体积均未见显著差异(P0.05)。结论:大鼠脑出血后应用高体重剂量红曲素(10 mg/Kg)可显著减少1-7 d的血肿体积及1-3 d血肿周围水肿体积,显著改善神经功能缺损程度,降低脑水含量、血红蛋白含量及血脑屏障通透性破坏,发挥神经保护作用。
【图文】：

蛋白表达,大鼠,红曲,术后死亡

实验过程中所有假手术组大鼠未见死亡。脑出血模型组 34 只，麻醉过程中死亡 1 只，术后死亡 2 只，出现蛛网膜下腔出血 1 只；红曲素低剂量治疗组 33 只，麻醉死亡 2 只，在观察时间点断头取脑时未见血肿 1 只；红曲素中剂量治疗组 34只，术后死亡 2 只，灌胃干预时死亡 1 只，出现蛛网膜下腔出血 1 只；红曲素高剂量治疗组 33 只，麻醉死亡 1 只，术后死亡 1 只，断头取脑无血肿 1 只。大鼠的总手术死亡率为 8.5% (n=14)，不同实验组间的手术死亡率差异不显著。以上各种原因缺失的实验数量均予以重新造模干预补齐。2.2 PPARγ、Nrf2 蛋白表达含量大鼠脑出血后与假手术组相比，，在各个时间点 PPARγ、Nrf2 的蛋白表达含量增加。与脑出血模型组比较，在术后第 1-3 天给予红曲素高剂量组干预后，PPARγ、Nrf2 的蛋白表达明显增加，经内参校正后，差异有统计学意义（见图 2-1）。

红曲,时间点,低剂量,神经功能缺损

的神经行为学评分显著降低，且呈现为相同趋势。以术后 3 d 行为缺损最重，其左侧肢体仅能轻微活动、无法攀岩，对躯干及触须基本无反应。随着时间延长，行为缺陷体征减轻，在第 7 d 时已得到明显改善。与ICH模型组相比，红曲素高剂量干预可显著改善大鼠神经功能，在第 1-7 d 均显著优于脑出血模型组，存在显著性差异；中剂量红曲素干预处理后，在第 3-7 d 可见评分高于模型组；各时间点低剂量红曲素干预后的神经功能缺损，与模型组相比未见明显改善（见表 2-1，图 2-2）。表 2-1 不同组别、不同时间点大鼠神经功能评分（分， x ± s）组别 24 h 3 d 7 d假手术组 15.67±0.94 16.67±0.47 17.5±0.5脑出血模型组 8.83±0.69* 5.83±0.69*#12.0±0.82*#红曲素低剂量组 9.0±0.82* 5.83±0.90*#12.17±0.67*#红曲素中剂量组 9.5±0.96* 7.0±0.82*#&14.17±0.69*#&红曲素高剂量组 11.67±0.75*&8.83±0.69*#&15.17±0.69*#&
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R743.34

【参考文献】