血红素加氧酶-1在肢体缺血后处理减轻脑缺血再灌注损伤中的作用
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【摘要】:目的:探讨血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在肢体缺血后处理(LPostC)减轻脑缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体缺血后处理组(LPost C组)和血红素加氧酶抑制剂锌原卟啉组(ZnPP组),每组20只。采用石蜡线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型。夹闭双侧股动脉5min,松开5min,反复循环3次,制备肢体缺血后处理模型。再灌注24h后,采用TTC染色检测脑梗死体积;TUNEL法检测神经细胞凋亡;分光光度计法测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平;用免疫组化和Western blot方法测定HO-1的表达。结果:与sham组相比,I/R组HO-1表达减少,SOD活性降低,MDA含量增加(P0.05)。与I/R组相比,Lpost C组脑梗死体积缩小,神经细胞凋亡数量显著减少,HO-1表达明显增加,SOD活性升高且MDA含量降低(P0.05)。与LPostC组相比,ZnPP组脑梗死体积扩大,神经细胞凋亡数量增多,HO-1表达明显减少,SOD活性降低,MDA含量升高(P0.05)。结论:肢体缺血后处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与血红素加氧酶-1(HO-1)的表达增加有关,从而抑制氧化应激损伤,减少神经细胞凋亡。
【关键词】:血红素加氧酶 肢体缺血后处理 脑 缺血再灌注损伤
【学位授予单位】:桂林医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R743.3
【目录】:
- 中文摘要5-6
- ABSTRACT6-8
- 英汉缩略词对照表8-9
- 前言9-11
- 1 材料与方法11-25
- 1.1 主要实验试剂与仪器11-15
- 1.2 实验动物与分组15
- 1.3 实验模型的制备15-17
- 1.4 TTC染色检测脑梗死体积17
- 1.5 分光光度计测S O D、M D A含量17-18
- 1.6 脑组织灌流固定、包埋、切片18
- 1.7 H E染色18-19
- 1.8 TUNEL 法测定细胞凋亡19-21
- 1.9 免疫组化测定H O - 1 的表达21-22
- 1.10 Western blot检测HO-1 蛋白表达22-25
- 1.11 统计学分析25
- 2 结果25-32
- 2.1 各组大鼠脑梗死体积25-26
- 2.2 各组大鼠脑组织中SOD活力和MDA含量26-27
- 2.3 各组大鼠脑组织的病理学改变27-28
- 2.4 各组大鼠细胞凋亡的结果28-29
- 2.5 各组大鼠脑组织中HO-1 免疫组化染色结果29-31
- 2.6 各组大鼠脑组织中HO-1 蛋白表达情况31-32
- 3 讨论32-35
- 4 结论35
- 参考文献35-39
- 综述39-49
- 参考文献44-49
- 攻读学位期间发表的学术论文目录49-50
- 致谢50
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