针刺对帕金森病转基因小鼠行为学改变及其纹状体miRNA-124表达的影响

发布时间：2020-07-12 16:14

【摘要】：目的:观察针刺是否影响帕金森病转基因小鼠miRNA-124表达水平;探讨针刺是否通过调控miRNA-124表达,抑制帕金森病转基因小鼠纹状体α-synuclein蛋白聚集,从而改善帕金森病转基因小鼠症状;探讨针刺是否通过调控miRNA-124表达,影响p-CREB、BDNF蛋白表达水平,通过miRNA-124/CREB/BDNF信号通路参与帕金森病发病机制。方法:建立转SNCA*A53T基因帕金森病C57BL/6J小鼠模型,分为阴性对照组,模型组,针刺组,拮抗剂组四组,针刺组在模型组的基础上予以针刺处理,拮抗剂组在模型组基础上同时予以针刺及miRNA拮抗剂处理。运用电针技术,采用连续波,频率2Hz,强度1m A,持续30分钟,每天一次,治疗2周。针刺穴位选“阳陵泉”、“太冲”二穴。采用悬挂、游泳等方法观察针刺治疗前后不同实验组小鼠行为学改变。采用RT-q PCR技术检测各组小鼠纹状体中miRNA-124表达情况。采用Western blot技术检测各组小鼠纹状体中α-synuclein、p-CREB、BDNF蛋白表达情况。结果:(1)悬挂及游泳实验评分:针刺干预前,阴性对照组显著高于模型组、针刺组及拮抗剂组(P㩳0.05),模型组、针刺组及拮抗剂组之间无统计学差异(P0.05)。针刺干预后,针刺组及拮抗剂组较针刺干预前明显改善(P㩳0.05),针刺组与拮抗剂组相比无统计学差异(P0.05)。(2)各组小鼠纹状体中miRNA-124表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中miRNA-124表达量显著下调(P㩳0.05)。与模型组比较,针刺组小鼠纹状体中miRNA-124表达增加(P㩳0.05),该表达增加作用可被miRNA-124拮抗剂阻断。(3)各组小鼠纹状体中α-synuclein表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中α-synuclein表达明显增加(P㩳0.05);与模型组相比,针刺组及拮抗剂组小鼠纹状体中α-synuclein表达下调(P㩳0.05),但针刺组较拮抗剂组表达下调更显著(P㩳0.05)。(4)各组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF均表达下调(P㩳0.05);与模型组相比,针刺组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达增加,(P㩳0.05),拮抗剂组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达无统计学差异。结论:(1)针刺可能通过上调miRNA-124表达,减少帕金森病转基因小鼠纹状体中α-synuclein蛋白的聚集,从而改善帕金森病转基因小鼠行为,但其作用机制可能是多重性的。(2)针刺可以上调p-CREB、BDNF蛋白的表达水平,miRNA-124/CREB/BDNF信号通路可能参与帕金森病发病机制。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R742.5
【图文】：

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3.2 帕金森病转基因小鼠纹状体中 miRNA-124 表达情况为探讨 miRNA-124 在帕金森病转基因小鼠模型大脑纹状体中表达情况及不同干预措施处理后小鼠纹状体中 miRNA-124 表达有无差异，我们采用 RT-qPCR 技术进行实时荧光定量检测，以 U6 为内参基因，采用 2-ΔΔCt计算各组小鼠纹状体中 miRNA-124的相对表达量，同时将阴性对照组 miRNA-124 表达量校正为 1。对多个独立样本各均数之间的比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）,结果发现：与阴性对照组相比，模型组小鼠纹状体中 miRNA-124 表达量（0.35±0.07）显著下调，差异有统计学意义（P㩳0.05 ）；与模型组比较，针刺组小鼠纹状体中 miRNA-124 表达增加（0.82±0.13），差异有统计学意义（P㩳0.05 ）,该表达增加作用可被 miRNA-124 拮抗剂阻断（0.47±0.09）。（详见表 3.2、图 3.5）

针刺,纹状体,情况,小鼠

针刺,拮抗剂,纹状体

【参考文献】