鞘内注射人脐带间充质干细胞对大鼠神经病理性疼痛的影响
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【摘要】:目的观察鞘内注射人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)对脊神经结扎(SNL)大鼠神经病理性疼痛(NP)行为学、炎症因子水平、脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞激活的影响。方法选择鞘内置管成功无运动功能异常的成年雄性SD大鼠48只,体重150-200g,随机均分为3组(n=16):Sham组(假手术+细胞培养液)、Control组(SNL+细胞培养液)、Treatment组(SNL+hUC-MSCs)。SNL术后第3天Sham组和Control组鞘内注射细胞培养液,Treatment组鞘内注射hUC-MSCs。各组分别于术前1d(基础值)和术后3、7、14d测机械痛阈(Mechanical paw withdrawal threshold,PWT)和热痛阈(Thermal paw withdrawal latency,PWL)。术后14d痛阈测定后取SD大鼠新鲜脊髓组织,行酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定炎症因子水平,免疫荧光及免疫印迹(Western Blot,WB)法测脊髓背角星形胶质细胞和小胶质细胞激活情况。结果1.与Sham组比较,Control组术后3、7、14d PWT及PWL均降低(P0.05)。与control组比较,Treatment组术后7、14d PWT和PWL明显升高(P0.05)。2.与Sham组比较,Control组的促炎症因子水平明显升高(P0.05)。与Control组比较,Treatment组促炎症因子水平明显降低(P0.05)。与Control组比较,Treatment组抗炎症因子水平升高(P0.05),3.与Sham组比较,Control组的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)表达明显增多(P0.05)。Treatment组与Control组比较,GFAP及Iba-1表达明显减少(P0.05)。结论鞘内注射hUC-MSCs可以通过减少促炎因子水平,增加抗炎因子水平,抑制星形胶质细胞和小胶质细胞的激活从而对SNL模型引起的NP起到治疗的作用。
【关键词】:神经病理性疼痛 人脐带间充质干细胞 星形胶质细胞 小胶质细胞 炎症因子
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R741
【目录】:
- 摘要4-6
- Abstract6-8
- 中英文缩写对照8-10
- 第一章 前言10-12
- 第二章 材料和方法12-24
- 2.1 主要设备和药品12-16
- 2.2 实验动物处理16
- 2.3 hUC-MSCs 的制备培养和鉴定16-17
- 2.4 动物模型制作17
- 2.5 机械痛阈和热痛阈的测定17-18
- 2.6 ELISA 法检测大鼠同侧脊髓背角 IL-17A、IL-1β、IL-1018-19
- 2.7 免疫荧光染色标记19-20
- 2.8 Western blot 法检测大鼠同侧脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 表达20-22
- 2.9 统计分析22-24
- 第三章 结果24-30
- 3.1 hUC-MSCs 流式细胞仪鉴定结果24-25
- 3.2 疼痛阈值测定25-26
- 3.3 各组大鼠脊髓背角 IL-17A、IL-1β、IL-10 水平26-27
- 3.4 各组脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 免疫荧光标记染色表达27-29
- 3.5 各组大鼠脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 表达29-30
- 第四章 讨论30-34
- 第五章 结论34-36
- 参考文献36-44
- 文献综述44-52
- 参考文献48-52
- 攻读硕士期间撰写的论文52-54
- 致谢54
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