轴突线粒体回运促进的神经元线粒体自噬在缺血性神经损伤中的保护作用研究

发布时间：2020-12-07 10:47

　　缺血性脑卒中,又称脑缺血,是一类由于血管狭窄或闭塞造成的短暂或永久性的脑供血不足引起的神经系统疾病。随着社会的发展,缺血性脑卒中的发病率逐年增高,已严重危害人类的健康。缺血性脑卒中病理机制复杂,目前尚无有效的药物治疗手段。细胞自噬是指细胞通过自噬泡和溶酶体途径对胞内物质进行降解的过程。对线粒体的选择性自噬被称为线粒体自噬。本课题组前期研究发现,在脑缺血后的再灌注过程中,神经元内的线粒体自噬被激活并发挥抗缺血性脑损伤作用,提示调控线粒体自噬可能是一种干预缺血性脑卒中的新策略。但是,缺血后神经元线粒体自噬发生及调控的过程尚不完全清楚。神经元形态高度极化,具有纤长的轴突,神经元轴突中分布有大量的线粒体,它们对神经功能的维持十分重要。然而,自噬的最终执行者——溶酶体主要集中于神经元细胞胞体。这样的分布差异提示缺血神经元轴突线粒体可能存在特异的自噬调控机制,然而目前尚无研究报道。本课题旨在明确缺血神经元中轴突线粒体的清除过程,并阐明其调控机制。本研究将有助于加深对神经元线粒体自噬的认识,并为进一步利用线粒体自噬干预缺血性脑损伤提供新思路,为抗缺血性脑损伤的药物靶点发现提供重要的实验依据。第一部分... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

氛精剥夺一再淮激活神经元线粒体自噬

浙江大学博士学位论文?第一部分??１．４．４荧光标记氧糖剥夺－再灌神经元中的线粒体与自噬泡??由于轴突中的自噬泡未完全成熟，其酸性可能不足以使ＧＦＰ荧光淬灭。因此，??我们进一步使用Ｍｉｔｏ－ＧＦＰ与ｍＣｈｅｒｒｙ－ＬＣ３分别标记线粒体与自嗤泡，观察它们的??共定位情况。结果显示：ＯＧＤ－Ｒｅｐ增加了神经元胞体与轴突中的自噬泡的数量（图??１－５．八与８），提示〇００－１＾口激活了自噬。但０００－１＾？仅在胞体内增加了含线粒??体的自喔泡，即线粒体自嗟泡（１１１丨１；０＾１＾０３０１１＾）的数量（图１－５．八与〇。自嗟抑??制剖巴佛洛霉素Ａ１?（ｂａｆｉｌｏｍｙｃｉｎＡｌ，?ＢａｆＡｌ）可引起自嗟泡的累积（图１－５．?Ａ与??Ｂ），但该作用也只增加了胞体中线粒体自噬泡的数量（图１－５．Ａ与Ｃ），而不引起??轴突线粒体自噬泡的数量变化。以上结果明确了?ＯＧＤ－Ｒｅｐ中，线粒体自噬激活仅??存在于神经元胞体中。??Ａ

Ｆｉｇｕｒｅ?１－６．?Ａｔｇ７?ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｆａｉｌｓ?ｔｏ?ｒｅｖｅｒｓｅ?ＯＧＤ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ａｘｏｎａｌ??ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ?ｌｏｓｓ．??（Ａ－Ｅ）?Ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｇｅｒｍｌｉｎｅ?ｍｉｃｅ?ｗｅｒｅ??ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ?ｔｏ?２０?ｍｉｎ?ｏｆ?ＯＧＤ?ｉｎ?ＤＩＶ８．?Ｔｈｅ?ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ?ｍａｒｋｅｒ?Ｈｓｐ６０?ａｎｄ?ｎｅｕｒｏｎａｌ??ｍａｒｋｅｒ?Ｐ－Ｔｕｂｕｌｉｎ?ＩＩＩ?ｗｅｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｂｙ?ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ?ａｔ?４０?ｍｉｎ?ａｆｔｅｒ?ｒｅｐｅｒｆｌｉｓｉｏｎ．??（Ａ）?Ｔｈｅ?ＡＴＧ７?ｌｅｖｅｌ?ｉｎ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ａｔｇ７１ｌ１Ｊ＼?ｎｅｓ－Ｃｒ＾?ｍｉｃｅ??ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ．?（Ｂ）?Ｉｍａｇｅｓ?ｓｈｏｗ?ｔｈｅ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｓｔｒａｉｇｈｔｅｎｅｄ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ??１８??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Regulation of mitophagy in ischemic brain injury[J]. Yang Yuan,Xiangnan Zhang,Yanrong Zheng,Zhong Chen.  Neuroscience Bulletin. 2015(04)



本文编号：2903119