线粒体分裂/融合失衡参与高糖缺氧对星形胶质细胞损伤的实验研究

发布时间：2020-12-09 01:03

　　目的使用高糖联合氧糖剥夺（OGD）模型模拟体内糖尿病和脑缺血再灌注损伤模型,探讨线粒体分裂/融合失衡是否参与高糖加重缺氧对星形胶质细胞的损伤。方法本研究体外培养星形胶质细胞,为了探讨高糖和（或）低氧干预对星形胶质细胞的影响及其机制,分组为:（1）正常糖浓度未缺氧组（NG-Con）:DMEM高糖完全培养基,常氧培养箱（37℃,5%CO₂）;（2）高糖培养未缺氧组（HG-Con）:加入50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培养基,常氧培养箱（37℃,5%CO₂）;（3）正常糖浓度缺氧缺糖组（NG-OGD）:DMEM高糖完全培养基培养24h后,放至低氧培养箱（37℃,1%O₂,5%CO₂）6h,然后再放回常氧培养箱0、6、12、24h;（4）高糖培养缺氧缺糖组（HG-OGD）:含50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培养基培养24h后,放至低氧培养箱（37℃,1%O₂,5%CO₂）6h,然后再放回常氧培养箱0、6、12、24h。通过CCK-8法检测不同葡萄糖... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
符号说明
前言
材料与方法
    1.材料
        1.1 主要试剂
        1.2 主要仪器设备
        1.3 主要试剂配置
    2.方法
        2.1 细胞培养
        2.2 氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）模型的建立
        2.3 实验分组
        2.4 CCK-8法检测细胞增殖活力
        2.5 流式细胞仪AnnexinV/PI双染试剂盒检测细胞凋亡
        2.6 DCFH-DA法检测ROS含量
        2.7 免疫细胞荧光
        2.8 免疫细胞化学
        2.9 WesternBlot检测Opa1、Mfn2、Fis1及Drp1的表达
        2.10 统计学处理
结果
    1.不同浓度葡萄糖可影响星形胶质细胞增殖活力
    2.倒置显微镜观察星形胶质细胞形态变化
    3.高糖加重缺氧引起星形胶质细胞凋亡
    4.高糖加重缺氧导致的星形胶质细胞ROS的过量产生
    5.线粒体分裂/融合失衡参与高糖缺氧对星形胶质细胞的损伤
        5.1 分裂因子Fis1的检测结果
        5.2 分裂因子Drp1的检测结果
        5.3 融合因子Mfn2的检测结果
        5.4 融合因子Opa1的检测结果
讨论
结论
附图
参考文献
文献综述
    综述参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
个人简介
开题、中期及学位论文答辩委员组成



本文编号：2905984