不同浓度大蒜素对星形胶质细胞增殖、迁移的影响
发布时间：2020-12-14 20:20
目的:本研究旨在探讨不同浓度大蒜素对星形胶质细胞增殖和迁移的影响。方法:1.三种大鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养方法比较。30只新生24小时以内的Wistar大鼠,随机分成3组,每组10只。每组称取等量皮质。A组:通过胰蛋白酶消化+涡旋振荡、差速离心+振荡法;B组:通过胰蛋白酶消化、差速贴壁+恒温摇床振荡法;C组:通过机械吹打、差速贴壁+恒温摇床振荡法;定期显微镜下观察细胞贴壁情况、生长状态、生长速度,纯化后每组计数细胞数目,测定细胞纯度。本实验重复三次,综合上述结果对A组培养方法进行评价。2.探讨不同浓度大蒜素对星形胶质细胞增殖和迁移的影响。以第一部分A组方法进行星形胶质细胞原代培养、测定纯度。传代后以不同浓度大蒜素（对照组0 μg/ml,A 组 50μg/ml,B 组 100μg/ml,C 组 200 μg/ml）干预 24 小时,通过CCK8及划痕实验,评价不同浓度大蒜素对星形胶质细胞增殖及迁移能力的影响。结果:1.1各组同等细胞密度下提取所得细胞悬液量:A组41.8±0.15ml,B组41.3±0.1ml,C 组 41.5±0.1ml,三组比较 F=11.3,P=0.009,两...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１倒置显微镜下观察：箭头处为杂细胞??
??：：?—?＾??＊?’?＇?－，、??图１倒置显微镜下观察：箭头处为杂细胞??２．?３各组细胞计数：??各组细胞经１８日培养均己覆盖培养瓶瓶底达到９０％以上，Ａ组；Ｂ组、Ｃ组（经恒温??摇床振荡进一步纯化后）经０．１２５％胰酶消化、离心、重悬后计数。各组收获细胞：各组收??获细胞数：Ａ?组（１４．２１?土?０．０５）?ｘｌＯ７?Ｂ?组（１３．９６±０．０３）?ｘｌ０７Ｃ?组（１３．４３±０．０３）?ｘｌＯ７。??三组比较?Ｆ＝２９４．１１８，?Ｐ＜０．?００１，两两组间比较：ＰＡ／Ｂ＝０．?０１３，?ＰＡ／Ｃ＜０．?００１，?ＰＢ／Ｃ＝０．?００１。三组间??存在统计学差异，各组收获细胞数如图２所示：??
图３各组细胞扩增率??２．?５各组细胞纯度鉴定结果：??各组处理后所得细胞经ＧＦＡＰ－ＦＩＴＣ免疫焚光结合ＤＡＰＩ染色（见图４），每次每组随机??选取５个高倍视野，每组各１５个高倍视野，分别计算纯度。众多研究人员使用差速贴壁??及摇床振荡纯化，都得到了比较高纯度的星形胶质细胞［２°＿２２］［２８］。各组纯度结果：Ａ组：９７．?８７％??土０．４９％?Ｂ组：９５．?９０％土０．４５％?Ｃ组：９６．?３８％?±０．５９％，见表４。三组之间纯度结果分析：??Ｆ＝５９．?２５８，Ｐ〈０．?００１，具有统计学差异；两两比较：ＰＡ／Ｂ＜０．?００１，?Ｐｖｅ〈０．?００１，ＰＢＡ．＝０．?０５３。Ａ?组??纯度最高且与Ｂ、Ｃ组间具有显著的统计学差异；Ｂ、Ｃ组之间无统计学差异。??图４星形胶质细胞免疫焚光图：绿色为ＧＦＡＰ染色，蓝色为ＤＡＰＩ染色???表４?各组提取所得星形胶质细胞纯度（％）???组别?均数?标准差?样本量??Ａ?组?９７．８７?０．４９?１５??Ｂ?组?９５．９０?０．４５?１５??Ｃ?组?９６．３８?０．５９?１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]左旋多巴联合普拉克索治疗帕金森病的疗效及对运动功能的影响[J]. 刘丹阳. 北方药学. 2019(04)
[2]卡比多巴-左旋多巴控释片治疗帕金森病合并睡眠障碍的临床效果观察[J]. 高方. 首都食品与医药. 2019(05)
[3]蒜素对黏虫的驱虫效果评价[J]. 张欢欢,郝曜山,王晓清,王亦学,杜建中,孙毅. 安徽农业科学. 2018(32)
[4]小鼠大脑皮质星形胶质细胞的原代培养及鉴定[J]. 高帆,余资江,曹文鹏,李玉美. 基因组学与应用生物学. 2018(07)
[5]大鼠星形胶质细胞无血清培养方法的研究[J]. 徐立新,贾梅,师忠芳,董丽萍,闫旭,王玉娇,陈烨,袁芳. 中华神经外科杂志. 2018 (06)
[6]大蒜素对KG-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制[J]. 娄诤,魏庆庆,王大维,谷焕鹏. 中国中药杂志. 2018(12)
[7]调控星形胶质细胞功能治疗中枢神经系统疾病的研究进展[J]. 李鑫,闵芳沅,王珊. 中南药学. 2017(04)
[8]一种改进的星形胶质细胞原代培养方法[J]. 徐平湘,齐特,肇玉明,刘晓卉,陆莉. 脑与神经疾病杂志. 2016(08)
[9]多聚左旋赖氨酸对大脑皮层星形胶质细胞体外培养的影响[J]. 何玲,刘露,陈国俊. 中国医药导报. 2016(13)
[10]缝隙连接偶联赋予星形胶质细胞合胞体以等电位[J]. Ma B,Buckalew R,Du Y,Kiyoshi CM,Alford CC,Wang W,McTigue DM,Enyeart JJ,Terman D,Zhou M,王晶. 神经损伤与功能重建. 2016(02)
本文编号：2916968
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１倒置显微镜下观察：箭头处为杂细胞??
??：：?—?＾??＊?’?＇?－，、??图１倒置显微镜下观察：箭头处为杂细胞??２．?３各组细胞计数：??各组细胞经１８日培养均己覆盖培养瓶瓶底达到９０％以上，Ａ组；Ｂ组、Ｃ组（经恒温??摇床振荡进一步纯化后）经０．１２５％胰酶消化、离心、重悬后计数。各组收获细胞：各组收??获细胞数：Ａ?组（１４．２１?土?０．０５）?ｘｌＯ７?Ｂ?组（１３．９６±０．０３）?ｘｌ０７Ｃ?组（１３．４３±０．０３）?ｘｌＯ７。??三组比较?Ｆ＝２９４．１１８，?Ｐ＜０．?００１，两两组间比较：ＰＡ／Ｂ＝０．?０１３，?ＰＡ／Ｃ＜０．?００１，?ＰＢ／Ｃ＝０．?００１。三组间??存在统计学差异，各组收获细胞数如图２所示：??
图３各组细胞扩增率??２．?５各组细胞纯度鉴定结果：??各组处理后所得细胞经ＧＦＡＰ－ＦＩＴＣ免疫焚光结合ＤＡＰＩ染色（见图４），每次每组随机??选取５个高倍视野，每组各１５个高倍视野，分别计算纯度。众多研究人员使用差速贴壁??及摇床振荡纯化，都得到了比较高纯度的星形胶质细胞［２°＿２２］［２８］。各组纯度结果：Ａ组：９７．?８７％??土０．４９％?Ｂ组：９５．?９０％土０．４５％?Ｃ组：９６．?３８％?±０．５９％，见表４。三组之间纯度结果分析：??Ｆ＝５９．?２５８，Ｐ〈０．?００１，具有统计学差异；两两比较：ＰＡ／Ｂ＜０．?００１，?Ｐｖｅ〈０．?００１，ＰＢＡ．＝０．?０５３。Ａ?组??纯度最高且与Ｂ、Ｃ组间具有显著的统计学差异；Ｂ、Ｃ组之间无统计学差异。??图４星形胶质细胞免疫焚光图：绿色为ＧＦＡＰ染色，蓝色为ＤＡＰＩ染色???表４?各组提取所得星形胶质细胞纯度（％）???组别?均数?标准差?样本量??Ａ?组?９７．８７?０．４９?１５??Ｂ?组?９５．９０?０．４５?１５??Ｃ?组?９６．３８?０．５９?１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]左旋多巴联合普拉克索治疗帕金森病的疗效及对运动功能的影响[J]. 刘丹阳. 北方药学. 2019(04)
[2]卡比多巴-左旋多巴控释片治疗帕金森病合并睡眠障碍的临床效果观察[J]. 高方. 首都食品与医药. 2019(05)
[3]蒜素对黏虫的驱虫效果评价[J]. 张欢欢,郝曜山,王晓清,王亦学,杜建中,孙毅. 安徽农业科学. 2018(32)
[4]小鼠大脑皮质星形胶质细胞的原代培养及鉴定[J]. 高帆,余资江,曹文鹏,李玉美. 基因组学与应用生物学. 2018(07)
[5]大鼠星形胶质细胞无血清培养方法的研究[J]. 徐立新,贾梅,师忠芳,董丽萍,闫旭,王玉娇,陈烨,袁芳. 中华神经外科杂志. 2018 (06)
[6]大蒜素对KG-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制[J]. 娄诤,魏庆庆,王大维,谷焕鹏. 中国中药杂志. 2018(12)
[7]调控星形胶质细胞功能治疗中枢神经系统疾病的研究进展[J]. 李鑫,闵芳沅,王珊. 中南药学. 2017(04)
[8]一种改进的星形胶质细胞原代培养方法[J]. 徐平湘,齐特,肇玉明,刘晓卉,陆莉. 脑与神经疾病杂志. 2016(08)
[9]多聚左旋赖氨酸对大脑皮层星形胶质细胞体外培养的影响[J]. 何玲,刘露,陈国俊. 中国医药导报. 2016(13)
[10]缝隙连接偶联赋予星形胶质细胞合胞体以等电位[J]. Ma B,Buckalew R,Du Y,Kiyoshi CM,Alford CC,Wang W,McTigue DM,Enyeart JJ,Terman D,Zhou M,王晶. 神经损伤与功能重建. 2016(02)
本文编号：2916968
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