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核蛋白PCNP对人神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

发布时间:2020-12-22 05:59
  背景神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)为一种肾上腺起源的肿瘤,是新生儿发病率较高的癌症。有大约50%的NB的发生是在2岁以内的婴幼儿时期,NB占儿童肿瘤的比例约为6-10%,致死率约为15%。NB是一种神经源性恶性肿瘤,NB细胞在体内和体外培养中,都出现了分化成神经细胞和神经胶质细胞的现象,因此将NB细胞作为一种细胞模型研究肿瘤分化和凋亡及其机制具有重要意义。目前国内外采用较多的用于研究肿瘤的生长、分化、凋亡等机制的NB细胞系主要有SH-SY5Y、SK-N-SH、SK-SN-BE2、LA-N-5等。而我们实验采用的NB细胞SH-SY5Y、SK-N-SH能够支持质粒的复制,使克隆的基因片段得到高效的表达,可表达神经元标志性物质,其细胞形态及其某些生理功能与正常神经元有相似之处,是目前国际上研究神经细胞功能比较理想的细胞模型。PCNP(PEST-containing nuclear protein)是一种新近发现的含有PEST序列的核蛋白,PCNP作为泛素连接酶NIRF(Np95/ICBP90-like RING figer protein)的底物首次于2004年由日本科学家... 

【文章来源】:河南大学河南省

【文章页数】:82 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

核蛋白PCNP对人神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响


PCNP大数据分析结果

过表达,灰度分析,表达水平,荧光


核蛋白 PCNP 对人神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响PCNP 的表达量相比对照组较低(P<0.01);图 B 为 Western内参,Western blot 检测 PCNP 蛋白表达;图 C 对 PCNP 进行的 SH-SY5Y 细胞和 SK-N-SH 细胞稳定株在 26KD 处 PCNP而沉默的稳定株 PCNP 表达明显低于对照(P<0.01),证明 PCNP 过表达及沉默稳定株均构建成功。A

细胞克隆,克隆形成,过表达,抑制细胞


核蛋白 PCNP 对人神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响减弱细胞克隆形成能力平板克隆检测 NB 细胞克隆形成能力,如图 1-4。图 A 为平板克隆数进行统计分析,可见 PCNP 过表达后 SH-SY5Y 和 SK-N-SH减少(P<0.01),PCNP 沉默后细胞克隆数比对照组增加(P<0.01),因神经母细胞瘤细胞克隆形成能力,而沉默促进细胞克隆形成能力


本文编号:2931263

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