东亚钳蝎氯毒素抑制胶质瘤细胞增殖的机制研究
发布时间：2020-12-25 11:37
肿瘤的代谢重编程是维持肿瘤细胞增殖存活的关键。从20世纪Warburg效应提出以来,人们对肿瘤代谢的认识不断加深,代谢重编程被认为是正常细胞转化为恶性肿瘤的显著性标志。在肿瘤细胞中代谢重编程主要表现为有氧糖酵解的增强和谷氨酰胺代谢的活跃等。神经胶质瘤（Glioma）是一种最常见的颅内肿瘤,因其高复发率、高死亡率的特点,一直以来被看作是临床治疗上的难题。课题组前期表达纯化得到的东亚钳蝎氯离子通道毒素蛋白（Buthus martensii Karshch chlorion channel toxin,BmKCT）,已被证实能够抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭,但是分子机制尚不清楚。本研究主要是通过代谢组学的方法探究BmKCT抑制胶质瘤细胞增殖的分子机制。首先,通过蛋白表达纯化得到融合蛋白GST-BmKCT,利用圆二色谱检测蛋白质的二级结构和热稳定性。利用MTT法检测GST-BmK CT的增殖抑制活性。利用气质联用仪（GC-MS）分析鉴定出胶质瘤细胞内63种代谢产物,并且发现与GST处理组相比,BnKCT处理胶质瘤细胞48小时胞内丙酮酸水平降低,谷氨酸和谷氨酰胺在胞内聚集。丙酮酸是由丙酮酸激酶（P...
【文章来源】：山西大学山西省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．２东亚钳蝎氯毒素的３Ｄ结构模型［３９］??．［３９１??
酰胺溶解就可以使细胞免于死亡。谷氨酰胺溶解是一种线粒体途径，涉及谷氨酰胺??酶对谷氨酰胺的初始脱氨基产生谷氨酸，然后将谷氨酸转化为ａ－ＫＧ，参与ＴＣＡ循环??产生ＡＴＰ和合成代谢碳（如图１．４所示）。谷氨酸转化为ａ－ＫＧ是由谷氨酸脱氢酶１??或其他转氨酶催化的（包括谷氨酸丙酮酸转氨酶２和谷氨酸草酰乙酸转氨酶２），其??中谷氨酸脱氢酶最为主要。谷氨酸脱氢酶是一种线粒体酶，大多数哺乳动物细??胞中具有广泛表达单一的由ＧＬＵＤ１基因编码的ＧＤＨ１酶特性，通常在人类癌症中??升高。研究己证实ｍＴＯＲＣｌ可通过过表达ＳＩＲＴ４，从而下调ＧＬＵＤ１催化活性，抑??制癌细胞增殖Ｐ］。谷氨酰胺溶解还支持分子的产生，例如谷胱甘肽和ＮＡＤＰＨ，它们??保护细胞免受氧化应激。越来越多的证据表明，许多类型的癌细胞具有控制氧化还??原改变的特性，与正常细胞相比，ＲＯＳ水平增加［７２－７３］。活性氧的适度增加可促进细??胞增殖和分化
Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ??Ｇｌｕｔａｍａｔｅ??图１．４谷氨酸在细胞内多种代谢途径？??Ｆｉｇ?１．４?Ｇｌｕｔａｍａｔｅ?ｉｓ?ｒｅｑｕｉｒｅｄ?ｆｏｒ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?ｃｅｌｌｓ［７０］??１．４论文的设计思路??１．４．１研究内容与意义??神经胶质瘤细胞简称胶质瘤，是一种死亡率高的原发性脑肿瘤。目前治疗胶质??瘤的方法仍是手术为主，放化疗为辅，但是依旧无法达到完全治愈的效果。近些年??新的治疗模式如免疫治疗、分子靶向治疗等也在临床上相继开展，从肿瘤的分子水??平出发寻找合适的靶向药物就显得尤为重要。从１９９３年蝎氯离子通道毒素被分离鉴??定至今，己被证实能特异地结合胶质瘤细胞并抑制其侵袭和转移［４（Ｍ３］。及》ＫＣＴ与??ＣＴＸ具有６８％的同源性，同样具有抑制胶质瘤细胞侵袭和增殖的能力［４５］，并能诱导??胶质瘤细胞凋亡［５１］，但是ＣＴ抑制胶质瘤细胞增殖和促凋亡的机制尚不清楚。??代谢重编程已经被确定为是肿瘤恶性转化的标志之一。代谢重编程主要发生在??肿瘤细胞中，是癌细胞为了满足自身发展所采取的策略。通过阻断肿瘤细胞特有的??代谢过程是有效地干预肿瘤增殖和生长的方法之一。??本研宄利用分子克隆表达纯化了融合蛋白ＧＳＴ－５ｗＫＣＴ和对照标签蛋白ＧＳＴ
【参考文献】：
期刊论文
[1]东亚钳蝎氯毒素通过下调PKM2介导的有氧糖酵解抑制神经胶质瘤细胞的增殖活性[J]. 蔡雨晴,杜军,薄涛,郭田田,付月君,梁爱华. 中国生物化学与分子生物学报. 2019(01)
[2]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[3]整合素αvβ3结构与激活及其肿瘤靶向药物的研究进展[J]. 戴明权,金海晓,严小军. 生物学杂志. 2018(04)
[4]整合素ανβ3与肿瘤细胞[J]. 王猛,黄顺,孙鹏辉,韩彦江,陈莉. 医学理论与实践. 2017(17)
[5]谷氨酸代谢与胶质瘤关系的研究进展[J]. 吕美珍,曾而明. 中华神经外科杂志. 2017 (05)
[6]基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在胶质瘤侵袭和转移中的作用[J]. 曾吉玲,杨振宇,马千权,张立芹,罗学港. 临床与病理杂志. 2015(02)
[7]MMP-2/MMP-9在炎症中的研究进展[J]. 王海波,俞为荣. 医学综述. 2014(17)
[8]东亚钳蝎神经毒素BmK CT三维结构分子建模及晶体生长条件的初步筛选[J]. 付月君,杜军,吴艳波,殷丽天,杨仁佳,史通麟,梁爱华. 华北农学报. 2009(05)
[9]代谢组学研究策略与方法的新进展[J]. 夏建飞,梁琼麟,胡坪,王义明,罗国安. 分析化学. 2009(01)
[10]代谢组学——肿瘤学研究的重要技术平台[J]. 洪毅,谈冶雄,王红阳. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2007(06)
博士论文
[1]东亚钳蝎氯离子通道毒素的生物活性研究[D]. 殷丽天.山西大学 2009
本文编号：2937572
【文章来源】：山西大学山西省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．２东亚钳蝎氯毒素的３Ｄ结构模型［３９］??．［３９１??
酰胺溶解就可以使细胞免于死亡。谷氨酰胺溶解是一种线粒体途径，涉及谷氨酰胺??酶对谷氨酰胺的初始脱氨基产生谷氨酸，然后将谷氨酸转化为ａ－ＫＧ，参与ＴＣＡ循环??产生ＡＴＰ和合成代谢碳（如图１．４所示）。谷氨酸转化为ａ－ＫＧ是由谷氨酸脱氢酶１??或其他转氨酶催化的（包括谷氨酸丙酮酸转氨酶２和谷氨酸草酰乙酸转氨酶２），其??中谷氨酸脱氢酶最为主要。谷氨酸脱氢酶是一种线粒体酶，大多数哺乳动物细??胞中具有广泛表达单一的由ＧＬＵＤ１基因编码的ＧＤＨ１酶特性，通常在人类癌症中??升高。研究己证实ｍＴＯＲＣｌ可通过过表达ＳＩＲＴ４，从而下调ＧＬＵＤ１催化活性，抑??制癌细胞增殖Ｐ］。谷氨酰胺溶解还支持分子的产生，例如谷胱甘肽和ＮＡＤＰＨ，它们??保护细胞免受氧化应激。越来越多的证据表明，许多类型的癌细胞具有控制氧化还??原改变的特性，与正常细胞相比，ＲＯＳ水平增加［７２－７３］。活性氧的适度增加可促进细??胞增殖和分化
Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ??Ｇｌｕｔａｍａｔｅ??图１．４谷氨酸在细胞内多种代谢途径？??Ｆｉｇ?１．４?Ｇｌｕｔａｍａｔｅ?ｉｓ?ｒｅｑｕｉｒｅｄ?ｆｏｒ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?ｃｅｌｌｓ［７０］??１．４论文的设计思路??１．４．１研究内容与意义??神经胶质瘤细胞简称胶质瘤，是一种死亡率高的原发性脑肿瘤。目前治疗胶质??瘤的方法仍是手术为主，放化疗为辅，但是依旧无法达到完全治愈的效果。近些年??新的治疗模式如免疫治疗、分子靶向治疗等也在临床上相继开展，从肿瘤的分子水??平出发寻找合适的靶向药物就显得尤为重要。从１９９３年蝎氯离子通道毒素被分离鉴??定至今，己被证实能特异地结合胶质瘤细胞并抑制其侵袭和转移［４（Ｍ３］。及》ＫＣＴ与??ＣＴＸ具有６８％的同源性，同样具有抑制胶质瘤细胞侵袭和增殖的能力［４５］，并能诱导??胶质瘤细胞凋亡［５１］，但是ＣＴ抑制胶质瘤细胞增殖和促凋亡的机制尚不清楚。??代谢重编程已经被确定为是肿瘤恶性转化的标志之一。代谢重编程主要发生在??肿瘤细胞中，是癌细胞为了满足自身发展所采取的策略。通过阻断肿瘤细胞特有的??代谢过程是有效地干预肿瘤增殖和生长的方法之一。??本研宄利用分子克隆表达纯化了融合蛋白ＧＳＴ－５ｗＫＣＴ和对照标签蛋白ＧＳＴ
【参考文献】：
期刊论文
[1]东亚钳蝎氯毒素通过下调PKM2介导的有氧糖酵解抑制神经胶质瘤细胞的增殖活性[J]. 蔡雨晴,杜军,薄涛,郭田田,付月君,梁爱华. 中国生物化学与分子生物学报. 2019(01)
[2]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[3]整合素αvβ3结构与激活及其肿瘤靶向药物的研究进展[J]. 戴明权,金海晓,严小军. 生物学杂志. 2018(04)
[4]整合素ανβ3与肿瘤细胞[J]. 王猛,黄顺,孙鹏辉,韩彦江,陈莉. 医学理论与实践. 2017(17)
[5]谷氨酸代谢与胶质瘤关系的研究进展[J]. 吕美珍,曾而明. 中华神经外科杂志. 2017 (05)
[6]基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在胶质瘤侵袭和转移中的作用[J]. 曾吉玲,杨振宇,马千权,张立芹,罗学港. 临床与病理杂志. 2015(02)
[7]MMP-2/MMP-9在炎症中的研究进展[J]. 王海波,俞为荣. 医学综述. 2014(17)
[8]东亚钳蝎神经毒素BmK CT三维结构分子建模及晶体生长条件的初步筛选[J]. 付月君,杜军,吴艳波,殷丽天,杨仁佳,史通麟,梁爱华. 华北农学报. 2009(05)
[9]代谢组学研究策略与方法的新进展[J]. 夏建飞,梁琼麟,胡坪,王义明,罗国安. 分析化学. 2009(01)
[10]代谢组学——肿瘤学研究的重要技术平台[J]. 洪毅,谈冶雄,王红阳. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2007(06)
博士论文
[1]东亚钳蝎氯离子通道毒素的生物活性研究[D]. 殷丽天.山西大学 2009
本文编号：2937572
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/2937572.html
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