GBP3在胶质瘤中的生物学功能及其机制研究

发布时间：2021-01-01 02:43

　　鸟苷酸结合蛋白家族（GBPs）是一类由干扰素-γ（IFN-γ）诱导的蛋白,目前国内外尚无GBP3在肿瘤方面的相关研究报道。本论文首先对GBP3在胶质瘤中的表达进行了分析和检测,接着研究了GBP3对胶质瘤生物学功能的影响以及p62-ERK1/2通路在GBP3促进胶质瘤细胞增殖中的作用,最后通过体内实验进一步验证了过表达GBP3促进胶质瘤增殖的作用,并对GBP3表达水平与患者生存期的关系进行了分析。目的:（1）研究GBP3在胶质瘤中的表达情况及其生物学功能;（2）对GBP3通过p62-ERK1/2通路调节胶质瘤细胞增殖的分子机制进行研究;（3）研究GBP3与胶质瘤细胞成瘤能力及患者预后的关系。方法:（1）对数据库信息进行筛选,对比胶质瘤和正常脑组织中GBP3表达情况;（2）收集正常脑组织、胶质瘤标本、星形胶质细胞和胶质瘤细胞系样品,q PCR法和Western blot法分别检测GBP3 m RNA和蛋白水平表达;（3）构建GBP3过表达和敲低表达的胶质瘤细胞株,并用Western blot法验证GBP3表达情况;（4）通过CCK-8实验和克隆形成实验检测敲低和过表达GBP3对细胞增殖能力... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GBP3与EGFmRNA表达呈正相关，GBP3可由EGF诱导表达上调

（C-D）GBP1 和 EGF 在胶质瘤和 GBM 中 mRNA 表达相关性，数据来embrandt 和 TCGA 数据库。（ E ）用含浓度为 100 ng/L EGF 的培养基培178-wtEGFR 和 U373-wtEGFR 胶质瘤细胞，通过 qPCR 法检测 GBP3 mRNA 表达照组加相同体积 PBS。（Pearson r<0.2 时无相关性，0.2-0.4 低度相关，0.4-0.6 中关，0.6-0.8 强相关，>0.8 代表极强相关。）2. 数据库结果提示 GBP3 在胶质瘤中 mRNA 高表达首先，我们分析了 Rembrandt 和 TCGA 两个数据库。Rembrandt 数据库将胶质为星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤和胶质母细胞瘤三种类型。其中，（图 2A）显示细胞瘤和胶质母细胞瘤（GBM）中的 GBP3 表达在 mRNA 水平上和正常脑组normal）相比升高且具有统计学意义（P<0.01, P<0.001）。而 TCGA 数据库则根据表达不同将 GBM 分为 classical, mesenchymal, neural 和 proneural 四种类型，它们BP3 表达都高于正常脑组织，（图 2B）提示 mesenchymal, neural 的 GBP3 表达较脑组织表达升高具有统计学意义（P<0.01, P< 0.01）。

GBP3 在胶质瘤中的生物学功能及其机制研究 第一部分 GBP3 在胶质瘤中的表达及生物学功检测到GBP3。同样，我们对收集的三例正常脑组织和28例胶质瘤样本中GBP3 mRN表达水平进行了检测。如（图 3B），虽然检测结果未有统计学意义（可能因样本量较少且个别样本表达差异较大引起），但是可以发现 GBP3 在胶质瘤中表达约为正常脑组织的两倍。（图 3C）结果提示在收集的胶质瘤细胞系中，有 55.6%（5/9 个）高表达 GBP3 蛋白，人脑正常星形胶质细胞 GBP3 表达较低。


本文编号：2950801