Girdin对恶性胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响

发布时间：2021-01-06 13:54

　　目的:Girdin是2005年新发现的肌动蛋白结合蛋白,它能够募集并联结、调控细胞内微丝,具有调节细胞生长、迁移、血管生成及自噬等功能。细胞迁移不仅在细胞重要生理活动中起作用,同时也是肿瘤发生、发展等病理过程中的重要步骤和关键环节。目前有研究报道,Girdin蛋白在促进肿瘤细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用,为进一步探索Girdin蛋白与肿瘤细胞迁移和侵袭的作用机制,本研究着眼于Girdin在胶质瘤细胞增殖和侵袭中的功能并阐明其相关分子机制,全面了解Girdin蛋白的功能为临床治疗恶性胶质瘤提供新的靶点。方法:第一部分:1、在PCDH-P-Vector载体的基础上构建PCDH-P-Girdin过表达慢病毒表达质粒,利用HEK-293T细胞包装慢病毒。2、慢病毒感染恶性胶质瘤细胞株LN229,提高Girdin蛋白的表达水平;通过Western Blotting技术验证其表达效率,并筛选出稳定表达的克隆。3、利用生长曲线分析Girdin过表达对胶质瘤细胞增殖能力的影响。4、划痕实验检测Girdin过表达对恶性胶质瘤细胞运动能力的影响。5、粘附实验检测Girdin过表达对恶性胶质瘤细胞粘附能力... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?ｐＣＤＨ－ＣＭＶ－ＭＣＳ－ＥＦｌ－Ｐｕｒｏ慢病毒表达载体图谱??２分别用?Ｂａｍ?Ｈ?Ｉ?和?Ｎｏｔ?Ｉ?酶双酶切ＣＤＨ－ＣＭＶ－ＭＣＳ?－ＥＦ１?－Ｐｕｒｏ?载体和?Ｇｉｒｄｉｎ??

和Ｇｉｒｄｉｎ／ＬＮ２２９。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测稳定细胞中Ｇｉｒｄｉｎ的表达情况，结??果显示与对照组Ｖｅｃｔｏｒ?／ＬＮ２２９细胞相比，Ｇｉｒｄｉｎ?／ＬＮ２２９细胞Ｇｉｒｄｉｎ蛋白表达显??著增加（如图２Ａ所示）。??Ａ??八?ＬＮ２２９?Ｖｅｃｔｏｒ／ＬＮ２２９?Ｇｉｒｄｉｎ／ＬＮ２２９??Ｇｉｒｄｉｎ?－??ＧＡＰＤＨ??图２?Ａ?ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ检测Ｇｉｒｄｉｎ蛋白在ＬＮ２２９细胞中的表达情况??为了观察Ｇｉｒｄｉｎ蛋白高表达后对胶质瘤细胞增殖能力的影响，本研究釆用??增殖实验连续观察６天中两组细胞存活增殖能力的差异，结果显示与Ｖｅｃｔｏｒ??／ＬＮ２２９细胞相比较，Ｇｉｒｄｉｎ／ＬＮ２２９细胞的增殖能力没有明显变化，差异不具有??统计学意义（如图２Ｂ所示）。??２５??

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本文编号：2960690