LRIG2基因全长及胞外段对胶质母细胞瘤细胞系生物学特性的影响及其机制

发布时间：2021-01-07 11:56

　　目的构建LRIG2基因全长及胞外段的慢病毒表达载体，建立稳定转染的人胶质母细胞瘤细胞系，并观察其蛋白的亚细胞定位。方法PCR扩增LRIG2基因全长（LRIG2）和胞外段（LRIG2ecto）片段，运用基因重组技术分别将片段插入慢病毒表达载体pLVX-Puro-3×Flag；将测序成功的载体pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2和pLVX-Puro-3×Flag-LRIG2ecto包装成慢病毒后分别转染胶质瘤细胞系U87，U251；嘌呤霉素筛选得到稳定细胞株。WesternBlot和Real-time RT-PCR检测稳定株中LRIG2蛋白和mRNA的表达。激光共聚焦检测LRIG2全长及胞外段蛋白的亚细胞定位。结果LRIG2全长及胞外段重组质粒测序序列完全正确。成功得到过表达LRIG2及LRIG2ecto的U87, U251稳定株，U87中LRIG2及LRIG2ecto过表达组相应的mRNA表达分别是对照组的8.42±0.50和29.58±0.98倍；U251中分别是对照组的65.83±4.14和126.34±0.98倍（P<0.01）。免疫荧光显示在U87及U251中，LR... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
目录
主要缩略词表
前言
参考文献
中文摘要
Abstract
第一部分 LRIG2 全长及胞外段慢病毒表达载体的构建及其在胶质母细胞瘤中的亚细胞定位
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
    附图
第二部分 LRIG2 全长及胞外段对胶质母细胞瘤细胞系增殖和凋亡的影响及其机制
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
    附图
第三部分 LRIG2 全长及胞外段对胶质母细胞瘤细胞系迁移和侵袭的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
    附图
综述
    参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of RNAi-mediated Gene Silencing of LRIG1 on Proliferation and Invasion of Glioma Cells[J]. 毛峰,王宝峰,席桂发,孙伟,张华楸,叶飞,郭东生,雷霆.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2012(02)



本文编号：2962518