JNK/MAPK信号通路介导川芎嗪对海马神经元损伤的保护机制研究

发布时间：2021-01-14 03:33

　　脑血管疾病是临床常见病、多发病,并且脑血管病患者的存活病人中有50-70%遗留不同程度的残疾,这些后遗症严重影响了患者的生命健康与生存质量。此外,随着医学科学技术的迅猛发展,围术期患者发生缺血／再灌注性脑损伤的风险也随之增大,因此围术期脑缺血再灌注损伤也是临床麻醉与复苏近年来所关注的热点。脑缺血再灌注损伤后中枢神经系统功能的恢复较差,脑缺血／再灌注损伤均会造成不同程度神经功能障碍。近年来国内外研究证实,脑缺血再灌注损伤不仅仅是由于脑氧供中断细胞能量供应不足导致的脑细胞凋亡,而是一个多环节、多因素、多途径的酶促级联反应。但其分子机制至今尚未完全明确。中药川芎嗪（TMP）常用于缺血性脑血管疾病及其后遗症的治疗,但其作用机制尚不明确,特别是从JNK信号转导通路探讨TMP预处理对缺氧／复氧大鼠海马神经元保护机制国内尚无文献报道。本研究拟在体外原代培养大鼠海马神经元细胞的基础上,以海马神经元细胞为研究对象建立细胞缺氧／复氧模型,模拟神经细胞的能量代谢障碍。观察不同浓度TMP预处理与JNK通路阻断剂SP600125对缺氧／复氧后海马神经元细胞凋亡细胞比例的影响,检测JNK信号转导通路相关蛋白的表达... 

【文章来源】：广州中医药大学广东省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
引言
第一章 文献研究和立项依据
    第一节 脑缺血/再灌注损伤的机制及研究概况
        一、自由基与缺血/再灌注损伤
        二、细胞凋亡与缺血再灌注损伤
        三、兴奋性氨基酸毒性与缺血再灌注损伤
        四、炎性反应与缺血再灌注损伤
        五、钙离子的超载与缺血再灌注损伤
    第二节 JNK通路与脑缺血再灌注损伤研究进展
        一、JNK的生物学特征
        二、JNK信号通路调节因子
        三、JNK介导细胞凋亡的机制
    第三节 川芎嗪对神经细胞凋亡保护机制的研究进展
        一、清除自由基、调节脂质代谢
        二、抗血小板聚集和血栓形成
        三、舒血管作用
        四、抑制钙超载
        五、调节凋亡相关基因的表达
        六、抑制Fas蛋白的表达
        七、影响细胞因子水平
    第四节 立论依据与研究意义
第二章 实验研究
    第一节 实验材料
        一、实验动物
        二、实验药物和试剂
        三、实验仪器
        四、实验前准备
        五、主要试剂的配制
    第二节 实验方法
        一、海马神经细胞原代培养
        二、实验分组及缺氧/复氧模型的建立
        三、具体实验方法
    第三节 实验结果
        一、相差显微镜下观察原代培养大鼠海马神经元形态学改变
        二、大鼠海马神经元细胞缺氧/复氧不同时间对其形态的影响
        三、不同浓度川芎嗪预给药对缺氧/复氧大鼠海马神经元凋亡率的影响
        四、不同浓度川芎嗪预给药对缺氧/复氧大鼠海马神经元c-fos、c-jun、p-jnk蛋白表达的影响
        五、不同浓度川芎嗪预给药对缺氧/复氧大鼠海马神经元MKK4、MKK7基因mRNA的表达水平的影响
        附图表
    第四节 讨论
        一、海马神经元原代培养
        二、JNK通路抑制剂SP600125与川芎嗪对缺氧/复氧海马神经元凋亡率的影响
        三、SP600125与川芎嗪对缺氧/复氧海马神经元C-fos、C-jun、P-JNK蛋白表达的影响
        四、SP600125与川芎嗪对缺氧/复氧海马神经元MKK4mRNA、MKK7mRNA的含量的影响
第三章 结语
参考文献
附录
致谢



本文编号：2976128