mTOR抑制剂依维莫司联合替莫唑胺对恶性胶质瘤细胞自噬作用影响的实验研究

发布时间：2021-01-20 18:50

　　目的:观察mTOR抑制剂依维莫司（Everolimus,RAD001）对U251细胞增殖、自噬的影响;同时探讨RAD001联合替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）对U251细胞增殖、自噬的影响;为RAD001在人恶性胶质瘤治疗方面提供可靠的理论依据。方法:本实验分为两个部分。第一部分我们通过体外实验探讨RAD001对U251细胞增殖、自噬的影响。首先,我们采用了CCK-8法检测不同工作浓度的RAD001在不同时间段对U251细胞增殖抑制的影响。使用透射电镜观测经RAD001处理后U251细胞内部超微结构的改变。采用免疫荧光观测经RAD001处理后的人胶质瘤细胞GFP-LC3融合蛋白的分布情况。再通过Western Blot检测RAD001对细胞内LC3B、Becli n-1、P62蛋白水平的影响。第二部分我们通过体外实验探讨RAD001联合TMZ对U251细胞增殖、自噬的影响。我们将U251细胞随机分为下列三组:空白对照组、TMZ单药组以及RAD001与TMZ联合组,采用CCK-8法了解各组细胞生长抑制情况;应用透射电镜观测空白对照组、TMZ单药及联合给药对U251细胞超微结构... 

【文章来源】：甘肃中医药大学甘肃省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

RAD001以浓度及时间依赖的方式抑制U251细胞活性的增殖抑制率曲线图

OR 抑制剂依维莫司联合替莫唑胺对恶性胶质瘤细胞自噬作用影响的实验研镜观察依维莫司对 U251 细胞超微结构的改变 的 RAD001 处理 U251 细胞 48h 后，使用透射电子显微自噬溶酶体的形成。从图 2 中可见大量双膜结构的自噬体体，里面含有分解的内质网、线粒体及高尔基复合物等残1 能够诱使 U251 细胞发生自噬。

21荧光观测经 RAD001 处理后的人胶质瘤细胞 GFP-LC3 融合蛋粒数量明显多于图 3A 中荧光斑点数量，图 3B 中细胞产生的B 的自噬作用更强。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer metabolic reprogramming: importance, main features, and potentials for precise targeted anti-cancer therapies[J]. Liem Minh Phan,Sai-Ching Jim Yeung,Mong-Hong Lee.  Cancer Biology & Medicine. 2014(01)



本文编号：2989582