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FOXD3对神经母细胞瘤体外生物学行为的调控作用及机制研究

发布时间:2021-01-24 08:43
  第一部分FOXD3基因真核表达载体构建及其在神经母细胞瘤细胞株中的表达目的:构建携带有外源性人FOXD3基因的真核表达载体,并瞬时转染神经母细胞瘤SK-N-SH及SK-N-MC细胞株,观测瘤细胞中FOXD3过表达,为后续实验做准备。方法:运用基因工程方法构建FOXD3真核表达载体,转染体外培养的神经母细胞瘤SK-N-SH及SK-N-MC细胞株,两种细胞系均分为三组,即空白对照组(control)、空白质粒组(plasmid negative control, PNC)及目的质粒组(FOXD3+),采用荧光显微镜观测转染效率,运用western blot和real-time PCR方法检测瘤细胞中FOXD3蛋白和mRNA过表达水平。结果:构建了FOXD3基因的真核表达载体;两种细胞系空白对照组均无荧光,PNC及FOXD3+组细胞均有绿色荧光,且两组荧光亮度及密度相近,经细胞计数分析转染效率达70%-85%。两种细胞系空白对照组和PNC组FOXD3蛋白及mRNA的表达水平低下,SK-N-SH及SK-N-MC细胞的FOXD3+组FOXD3蛋白表达水平较PNC组分别升高5.78倍(P<0... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:80 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 FOXD3 基因真核表达载体构建及其在神经母细胞瘤细胞株中的表达
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 FOXD3 基因过表达对神经母细胞瘤细胞增殖、凋亡的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 FOXD3 基因过表达对神经母细胞瘤细胞侵袭迁移、血管生成的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
研究小结
综述 FOXD3 的生物学功能研究 THE BIOLOGICAL FUNCTION STUDYON FOXD363
    参考文献
附录 攻读硕士学位期间发表论文目录
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]Nanog and transcriptional networks in embryonic stem cell pluripotency[J]. James A Thomson.  Cell Research. 2007(01)



本文编号:2996956

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