miR-183通过LRIG1调控EGFR/AKT通路在胶质母细胞瘤放疗耐受中的作用及机制研究

发布时间：2021-01-26 07:23

　　研究背景与目的:胶质瘤是最常见的肿瘤相关性死亡的原因。基于放射治疗的疗法似乎有效,然而多种胶质母细胞瘤细胞产生的放疗耐受却能逆转此种疗效。因此,应用潜在的放疗耐受机制对于胶质瘤的治疗十分重要。本研究通过构建放疗耐受胶质瘤细胞系U251R,检测miR-183与LRIG1在脑胶质瘤组织及细胞中的表达及其相关性,进一步探讨miR-183介导EGFR/AKT通路在胶质母细胞瘤放疗耐受中的作用及机制,以期为胶质瘤放射治疗提供新的思路。方法:不同剂量X线照射干预后构建胶质瘤放疗耐受细胞系U251R。分别用CCK-8和Annexin V/PI测胶质母细胞瘤细胞活力及凋亡情况。采用Real-time PCR和western blot检测相关基因及蛋白的表达。荧光素酶实验检测miR-183与LRIG1之间的关系。通过构建胶质瘤异种移植裸鼠模型,验证miR-183与放疗耐受在体内的作用机制。结果:与放疗敏感的胶质瘤组织相比,放疗耐受组织中miR-183表达显著增加,而LRIG1 m RNA的表达降低。LRIG1在放疗耐受胶质瘤细胞系U251R低于正常胶质瘤细胞系U251中的表达水平。U251R中过表达的m... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实时荧光定量-PCR检测放疗敏感组织和耐受组织中miR-183和LRIG1的表达水平

图 2 胶质母细胞瘤细胞系 U251、U251R 细胞凋亡和细胞活力检测3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 检测 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表达水平对 U251、U251R 细胞进行实时荧光定量 PCR 检测 miR-183 和 LRIG1 mRNA表达水平，Western blot 检测 LRIG1 表达水平，结果显示，通过 qRT-PCR 检测miR-183 在放疗耐受胶质瘤细胞系 U251R 表达水平高于正常胶质瘤细胞系 U251（P < 0.05），通过 qRT-PCR 和 Western blot 检测 LRIG1 在放疗耐受胶质瘤细胞系 U251R 低于正常胶质瘤细胞系 U251 中的表达水平（P < 0.05），见图 3。

图 2 胶质母细胞瘤细胞系 U251、U251R 细胞凋亡和细胞活力检测3.1.3 qRT-PCR 和 Western blot 检测 U251、U251R 中 miR-183 和 LRIG1表达水平对 U251、U251R 细胞进行实时荧光定量 PCR 检测 miR-183 和 LRIG1 mRNA表达水平，Western blot 检测 LRIG1 表达水平，结果显示，通过 qRT-PCR 检测miR-183 在放疗耐受胶质瘤细胞系 U251R 表达水平高于正常胶质瘤细胞系 U251（P < 0.05），通过 qRT-PCR 和 Western blot 检测 LRIG1 在放疗耐受胶质瘤细胞系 U251R 低于正常胶质瘤细胞系 U251 中的表达水平（P < 0.05），见图 3。

【参考文献】：
期刊论文
[1]肝癌血清中miRNA-183的表达及临床意义[J]. 张自立,石文霞,李霖,孟祥朝,高英堂,杜智.  天津医科大学学报. 2017(06)
[2]结肠癌患者血清中microRNA-183及胸苷激酶1的表达及意义[J]. 王金亮,孟祥朝,张自立,李琦.  天津医药. 2017(01)
[3]肝癌细胞miR-183表达及上下游调控机制探讨[J]. 王欣欣,崔海鹏,董建一,李慧玲,陈军,王福金,王爱国,王靖宇.  中华肿瘤防治杂志. 2016(16)
[4]非小细胞肺癌患者血浆miR-10b、miR-122、miR-16和miR-183水平及其与总生存期的关系[J]. 王富民,张寰,曲金力,钱碧云.  山东医药. 2016(08)
[5]MiR-183抑制胶质母细胞瘤放射抵抗等恶性行为[J]. 曾宪一,陈嘉荣,任陈,杜莎莎,谢国柱,郑榕,袁亚维.  实用医学杂志. 2015(24)



本文编号：3000712