实验性自身免疫性重症肌无力体液免疫及胸腺潜在治疗靶点研究

发布时间：2021-01-30 11:45

　　研究背景:重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是抗体介导的器官特异性自身免疫疾病,其特征在于抗乙酰胆碱受体（anti-acetylcholine receptor,anti-AChR）抗体与神经肌肉接头（neuromuscular junction,NMJ）的突触后膜中的乙酰胆碱受体或相关分子结合,主要临床表现为骨骼肌易疲劳和无力。MG的体液免疫发病机制包括滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cells,Tfh）的异常增殖和生发中心（germinal center,GC）的形成。滤泡辅助型T（follicular helper T cells,Tfh）细胞,定义为CD4+CXCR5+ICOS+T细胞,主要作用是促进和维持生发中心（germinal center,GC）的形成并促进GC中B细胞的分化,辅助B细胞产生抗体,在体液免疫中发挥了重要的调节作用。其表面的趋化因子受体CXCR5促进Tfh细胞向GC的迁移。在MG患者中,胸腺增生与异位生发中心的形成相关,从而促进胸腺中B细胞产生抗AChR的抗体。Toll样受体9（toll-like recept... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．阻断ＴＬＲ９信号通路抑制了?ＥＡＭＧ大鼠疾病的发展

?山东大学博士学位论文???（＊?ｐ?＜０．０５；?＊＊ｐ?＜０．０１；?＊＊＊ｐ＜０．００１）。??２．阻断ＴＬＲ９信号通路减少了?ＥＡＭＧ大鼠体内抗体的产生??ＭＧ是由抗体介导的自身免疫性疾病，故抗体的水平直接影响到临床症状的严重程??度。在本实验中，我们通过ＥＵＳＡ测量了?ＥＡＭＧ大鼠血清中抗Ｒ９７－１１６ＩｇＧ抗体，及??其亚型ＩｇＧｌ、ＩｇＧ２ａ和ＩｇＧ２ｂ抗体的水平。如图２Ａ所示，与对照组相比，Ｈ１５４组??ＥＡＭＧ大鼠体内?ＩｇＧ?（＊?ｐ?＜０．０５）、ＩｇＧ２ａ?（＊?ｐ?＜０．０５）和?ＩｇＧ２ｂ?（ｐ?＝?０．６２）水平降??低。另外我们还检测到，强化免疫后血清中ＩｇＧ抗体的水平随着疾病的进展而逐渐升??高（图２Ｂ）。??Ａ??２５?，?？?ｃｏｎｔｒｏｌ??？？？?丄?？？？?？?Ｈ１５４??Ｓ?２．０－?？？？?■■?？??１?上：?？？？?＾?？？？??ＩＪ?１５＿?－?＿??＾?＞?？？？?？?■■??Ｔ－?Ｑ???■??ｏ?１０－?？？？??！?０．５－??０．０－＊?１?１?１?１???ＩｇＧ?ｌｇＧ１?ｌｇＧ２ａ?ｌｇＧ２ｂ??Ｂ??－０－?ｃｏｎｔｒｏｌ??１．４－?－？－?Ｈ１５４??１．２－??ｆ１。－?＂＂＂＂＂°??００．６－?卜??０．４－??０．２－??〇．〇－＊?１?１?１?１??１６?２６?３６?４６??ｄａｙｓ?ｐｏｓｔ?ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ??图２．?Ｈ１５４降低了?ＥＡＭＧ大鼠体内的抗体水平。（Ａ）?ＥＬＩＳＡ法检测抗Ｒ－ＡｃｈＲ９７－ｌ?１６??

?山东大学博士学位论文???Ｔｉｌｌ细胞在促进Ｂ细胞增殖分化，促进ＧＣ形成及调节抗体亲和力等方面发挥了关??键作用。为了探究Ｈ１５４对ＥＡＭＧ大鼠体液免疫作用，我们应用流式细胞术检测了??ＥＡＭＧ大鼠脾脏中的Ｔｆｈ细胞（定义为ＣＤ４＋ＣＸＣＲ５＋丨ＣＯＳ＋Ｔ细胞）和生发中心Ｂ细咆??（Ｂ２２０＋ＰＮＡ＋）的比例。如图３Ａ所示，Ｈ１５４显著降低了?ＥＡＭＧ大鼠脾脏ＣＤ４＋Ｔ细胞??中Ｔｆｌｉ细胞的比例（＊／７＜０．０５）。同时Ｈ１５４处理的ＥＡＭＧ大鼠脾脏ＧＣ中的Ｂ细胞比??例也明显降低（＊ｐ?＜〇．〇５）（图３Ｂ）。我们进一步通过免疫荧光法证实了?Ｈ１５４处理??组ＥＡＭＧ大鼠的ＧＣ中Ｂ细胞比例的降低（图３Ｄ）。此外，我们还检测了两组大鼠体??液免疫的下游分子浆细胞的变化，然而并未发现显著差异。以上结果表明，阻断ＴＬＲ９??信号传导可以有效的抑制ＥＡＭＧ大鼠脾脏内体液免疫反应（图３Ｃ）。??Ｇａｔｅｄ?ｏｎ?ＣＤ４４?Ｔ?ｃｅｌｌｓ??Ａ????ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ１５４?１〇??Ｂ，ｊ?〇４％?ｆ?０．８．??〇?ｉ〇２?ｔｏ３?ｉ〇４?ｉ〇９?〇?１０＾?ｉ〇３?ｉ〇４?ｔｏ５?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ１５４???？?ＣＸＣＲ５?＾?．??Ｓｐｌｅｅｎ??Ｂ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ１６４?老?１０１?〇?２．０＾??？＊：?６．５％?１．５％?｜?８．?￣：￣?＾?＿ｎＳ??ｏ?ｉｏ＊?ｔｏ３?ｔｏ４?ｉｏ＊?ｏ?ｉ〇＊?ｔｏ４?ｉｏｆｔ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ１５４?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ１５４??８２２０?Ｓｐｌｅｅｎ?Ｓｐｌｅｅｎ??Ｄ?ＰＮＡ?ＩｇＭ?ＰＮＡ?ＩｇＭ?


本文编号：3008840