MPP+通过mTOR信号通路下调PC12细胞的自噬活性

发布时间：2021-02-11 09:17

　　目的：1.观察不同浓度及不同时间点的MPP+对PC12细胞的存活率的影响，确定PD（Parkinson’s disease）细胞模型的合适浓度及时间范围；2.观察MPP+对PC12细胞的存活率、LDH漏出率及自噬-溶酶体途径相关蛋白LC3-II、Beclin1的表达水平的影响，并观察雷帕霉素（Rapamycin，RAPA）的拮抗作用；3.观察MPP+对自噬上游调控蛋白mTOR（哺乳动物雷帕霉素靶蛋白）及其信号通路相关蛋白的表达水平影响，并观察RAPA的作用。方法：根据不同浓度及作用不同时间MPP+对PC12细胞活性的影响，选择合适的MPP+处理浓度及时间，利用PC12细胞经过MPP+处理制作帕金森模型，再给予RAPA进行干预：MTT法检测细胞存活率，LDH试剂盒检测上清液中的LDH活性，Western blot技术分析LC3-II、Beclin1、mTOR、Raptor、Rictor、p-p70s6k、p-4E-BP1蛋白表达水平的变化，探讨MPP+调节PC12细胞自噬活性的机制。结果：1. PC12细胞相对存活率随MPP+浓度梯度呈降低趋势，MPP+浓度在0.25～3.0mM范围内细... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

不同浓度的MPP+对PC12细胞存活率的影响

不同时间点的MPP+对PC12细胞存活率的影响

MPP+对LC3蛋白表达水平的影响

【参考文献】：
期刊论文
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[3]MPTP/MPP+诱导的帕金森病实验模型的研究进展[J]. 解洪荣,张玉花,李雪松,王立崚,胡林森.  医学综述. 2011(05)
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[5]mTOR信号通路与学习记忆[J]. 张笋,王维平.  医学综述. 2010(13)
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本文编号：3028884