p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

发布时间：2021-03-01 02:16

　　目的探讨p300/CBP相关因子（PCAF）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的作用及机制。方法组织块贴壁法获取大鼠原代VSMCs,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMCs抑制PCAF表达。选择1μg/mL的脂多糖（LPS）作为VSMCs增殖诱导剂。将实验分为6组:对照组（A组）、对照组+1μg/mL脂多糖刺激组（B组）、Ad-GFP腺病毒转染组（C组）、Ad-GFP腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组（D组）、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染组（E组）、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组（F组）,使用CCK-8和流式细胞周期检测细胞增殖情况,各组中PCAF表达采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测,蛋白免疫印迹法检测各组丝裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（p-p38 MAPK）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）表达水平。结果 1μg/mL脂多糖明显促进VSMCs增殖;同时,下调PCAF表达后,VSMCs增殖活性明显降低（P<0.05）。流式细胞周期检测结果显... 

【文章来源】：中西医结合心脑血管病杂志. 2020,18(17)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

大鼠VSMCs及Ad-PCAF RNAi重组腺病毒转染VSMCs效率的鉴定

当脂多糖使用浓度为1 μg/mL时VSMCs增殖能力明显提高,但随着脂多糖浓度的进一步增加其增殖能力增速减慢,故在本实验中选择脂多糖浓度为1 μg/mL。详见图2。2.3 各组PCAF mRNA表达及VSMCs增殖活性比较

与A组比较,C组细胞周期分布差异无统计学意义(P>0.05);与C组比较,D组细胞经脂多糖刺激后S期(蓝色斜线区域)细胞明显减少,而G2期(黄色区域)细胞占比明显增多(P<0.05),提示脂多糖刺激后细胞由S期(蓝色斜线区域)进入G2期(黄色区域),细胞周期进展加快,细胞增殖能力增强。然而与D组比较,F组下调PCAF后,S期(蓝色斜线区域)细胞明显增多,G2期(黄色区域)细胞占比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞周期S期到G2期阻滞,细胞增殖能力减弱。详见图3。2.5 下调PCAF抑制p-p38 MAPK及p-AKT表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]斑蝥素对血小板衍生生长因子BB诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的机制研究[J]. 邱立强,徐昌武,李雯静,江洪,吴刚,罗强,夏豪.  中华老年心脑血管病杂志. 2019(01)
[2]赖氨酸乙酰转移酶2B与动脉粥样硬化关系的研究进展[J]. 邱立强,徐昌武,夏豪.  中华老年心脑血管病杂志. 2018(05)



本文编号：3056814