永久性双侧颈总动脉结扎大鼠海马AMPK-mTOR的时向变化及与神经功能评分关系
发布时间：2021-03-08 05:04
目的：建立大鼠2-VO法脑缺血模型，探讨急性缺血性脑损伤中单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMP-activated potein kinase，AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）表达的时向变化及其与神经缺陷评分（NDS）的相关性。方法：选取健康清洁级雌性SD大鼠24只，随机分为假手术组（A组）、脑缺血4小时组（B组）、脑缺血8小时组（C组）、脑缺血24小时组（D组），每组6只大鼠。参照大鼠2-VO法并改良，建立大脑急性缺血模型，A组麻醉后仅手术暴露双侧颈总动脉并游离出迷走交感神经链，不做双侧动脉结扎和离断，缝合切口待苏醒后参照改良的神经功能缺陷评分（NDS）法从意识、基本反射、感觉、运动、行为等方面进行评分，之后断头处死取双侧海马；B、C、D组均麻醉后实施手术暴露双侧颈总动脉，游离出双侧迷走交感神经链，结扎双侧颈总动脉近心端与离心端，并于结扎段中点剪断颈总动脉，分别于术后4h（B组）、8h（C组）、24h（D组）断头处死后取双侧海马组织，各组处死前15min均先进行NDS评分；所有大鼠模型采用左侧海马行Western B...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠海马组织光镜下图像
ene 方差齐性检验得，P=0.024＜0.05，示四个总体的方差分析。与假手术组（A 组）相比，缺血 4 小时（B 组））的 NDS 评分均下降，且其值随时间点逐渐增高，差异＜0.01）；缺血 24 小时（D 组）的 NDS 评分最高，与假没有统计学意义（p＞0.05）；见表 3.2 及图 3.2。3.2 各组大鼠神经功能缺损评分（NDS）结果的比较( x s)*（分Table 3.2 Comparison of NDS in each group( x s)（score）例数 x±s（分）6 77.67±2.0666646.67±10.33**61.00±3.79**70.50±5.61比, **P＜0.01, *P＜0.05＜0.01, *P＜0.05, versus group A
图3.3 western blot检测各组p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR的蛋白表达变化 与A组相比**p＜0.01、*p＜0.05Fig3.3 The expression of p-AMPK/AMPK and p-mTOR / mTOR proteins in different groups bywestern blot **p＜0.01、*p＜0.05，versus group A3.4 p-S6K1、p-4EBP1 在各时间点的表达情况参照 FARHAT 等人的实验[22]，采用 p-S6K1/β-actin 及 p-4EBP1/β-actin 来说明 mTOR 下游两条通路的表达情况。具体见表 3.4.1 及图 3.4.1。实验结果显示：在脑组织缺血后 p-s6k1 的表达明显减弱，B 组最低，与 A 组相比差异具有显著统计学意义（p<0.01），随缺血时间延长 B、C、D 组呈递增趋势，B、C 组与A 组相比，差异具有显著统计学差异（P＜0.01）D 组最高，与 A 组相比差异无统计学意义（p＞0.05）；p4E-BP1 的表达在脑缺血后各组较 A 组均明显减弱，但随缺血时间延长而逐渐增强，D 组最高，差异均具有显著统计学意义（p<0.01）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]AMPK在胰岛素信号转导通路中的作用[J]. 黄德强,罗凌玉,王丽丽,罗时文,吕农华,罗志军. 中国细胞生物学学报. 2011(11)
[2]细胞周期抑制剂对局灶性缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的影响[J]. 张贵斌,徐运兰,王伟,谢敏杰. 中华急诊医学杂志. 2006(01)
[3]兴奋性氨基酸与脑梗死关系的临床研究[J]. 盛宝英,乔香兰,王明礼. 中国急救医学. 2001(12)
本文编号：3070463
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大鼠海马组织光镜下图像
ene 方差齐性检验得，P=0.024＜0.05，示四个总体的方差分析。与假手术组（A 组）相比，缺血 4 小时（B 组））的 NDS 评分均下降，且其值随时间点逐渐增高，差异＜0.01）；缺血 24 小时（D 组）的 NDS 评分最高，与假没有统计学意义（p＞0.05）；见表 3.2 及图 3.2。3.2 各组大鼠神经功能缺损评分（NDS）结果的比较( x s)*（分Table 3.2 Comparison of NDS in each group( x s)（score）例数 x±s（分）6 77.67±2.0666646.67±10.33**61.00±3.79**70.50±5.61比, **P＜0.01, *P＜0.05＜0.01, *P＜0.05, versus group A
图3.3 western blot检测各组p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR的蛋白表达变化 与A组相比**p＜0.01、*p＜0.05Fig3.3 The expression of p-AMPK/AMPK and p-mTOR / mTOR proteins in different groups bywestern blot **p＜0.01、*p＜0.05，versus group A3.4 p-S6K1、p-4EBP1 在各时间点的表达情况参照 FARHAT 等人的实验[22]，采用 p-S6K1/β-actin 及 p-4EBP1/β-actin 来说明 mTOR 下游两条通路的表达情况。具体见表 3.4.1 及图 3.4.1。实验结果显示：在脑组织缺血后 p-s6k1 的表达明显减弱，B 组最低，与 A 组相比差异具有显著统计学意义（p<0.01），随缺血时间延长 B、C、D 组呈递增趋势，B、C 组与A 组相比，差异具有显著统计学差异（P＜0.01）D 组最高，与 A 组相比差异无统计学意义（p＞0.05）；p4E-BP1 的表达在脑缺血后各组较 A 组均明显减弱，但随缺血时间延长而逐渐增强，D 组最高，差异均具有显著统计学意义（p<0.01）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]AMPK在胰岛素信号转导通路中的作用[J]. 黄德强,罗凌玉,王丽丽,罗时文,吕农华,罗志军. 中国细胞生物学学报. 2011(11)
[2]细胞周期抑制剂对局灶性缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的影响[J]. 张贵斌,徐运兰,王伟,谢敏杰. 中华急诊医学杂志. 2006(01)
[3]兴奋性氨基酸与脑梗死关系的临床研究[J]. 盛宝英,乔香兰,王明礼. 中国急救医学. 2001(12)
本文编号：3070463
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