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MDM4三个新转录本的发现及其与胶质瘤相关性的初步研究

发布时间:2021-03-09 02:44
  脑胶质瘤是颅内最为常见的神经上皮肿瘤,虽然近年来,影像学诊断,显微外科手术,化疗,放疗等方面都有不同程度的进步,但在肿瘤的预后上却没有显著的延长。因此如何提高脑胶质瘤的综合治疗疗效一直是神经外科领域的难题。近几年来,关于肿瘤分子生物学方面的研究不断增多,因而如何阐述胶质瘤发生、发展的分子机制,寻找特异性诊断和治疗的靶标则成为目前胶质瘤研究的热点。可变剪接机制是基因转录后一项精密而复杂的调控机制,与人类遗传病有着紧密的联系,更被认为是癌症表达的天然来源。针对肿瘤mRNA的可变剪接研究在针对肿瘤的及时诊断和治疗均有非常重要的作用。MDM4基因(Murine double minute4,鼠双微基因4)是我科在前期工作中利用基因芯片技术筛选出的与胶质瘤患者预后和化疗敏感性相关的一个基因。该基因是p53上游重要的调控因子,但在肿瘤发生中是致癌基因还是抑癌基因的作用目前仍尚存争议。目前考虑MDM4基因的复杂功能和存在的争议可能与MDM4剪切变异体的存在有关;虽然近几年来,MDM4基因在胶质瘤中的功能研究不断深入,但是在胶质瘤中的剪接现象研究却鲜有报道。鉴于该基因在胶质瘤中的重要性以及可变剪接现象... 

【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】:85 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

MDM4三个新转录本的发现及其与胶质瘤相关性的初步研究


MDM4基因的可变剪切和外显子组织示意图

琼脂,琼脂糖凝胶电泳


tgttg gaataaaagt tgaagctgct gatactgtaagtg acaaaaaggt gattgaagtg ggaaaaaagtg atgataccga tgtagaggtt acctctggaaat ttaactctcc aagcaagagg tactgtggtatt cagattgttc aaagttaacc cattctcctgaaa aggaaaatga aggaaatgat gtcccttcgtta gacctaaaga tgcgtatata aagaaactcag tggaattctt ggatttggct cacagttgggag aacagttaga taacctttct gaacaggccaga atctcttgaa gccatgtagc ttatgtgttcatg gaaggacggg ccatcttgtc acttgtctgggg cttcatgccc tatttgcaag aaagaataat ggtagtacga acataaaaat gcattt RT-PCR 结果总 RNA 的 OD260/OD280为 1.8-2.0。1.5%琼脂带清晰,并且 28S 的量约为 18S 的 2 倍,提转录使用(图 1.2)。

引物,琼脂糖凝胶电泳,样本,条带


学位论文病理级别星形胶质细胞瘤 cDNA 先以 GAPDH 为引物进行,发现在 496bp 附近有明显条带(图 1.3),EXON11FN10R 和 EXON7F/EXON7R 三对引物进行扩增,用 1%琼脂851bp,500bp 附近有明显条带,且有拖带(图 1.4)。考虑产改用 3%琼脂糖凝胶电泳发现有强弱不等的 6 条带(图 1.5


本文编号:3072109

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