线粒体分裂抑制剂通过抑制自噬加重OGD/R损伤

发布时间：2021-03-12 05:18

　　目的探讨线粒体分裂抑制剂（Mdivi-1）处理对原代培养的皮层神经元缺血再灌注损伤的作用及其机制研究。方法在原代培养的小鼠皮层神经元上建立氧糖剥夺/复氧复糖（OGD/R）模型模拟体内缺血再灌注损伤,根据再灌注时间长短检测自噬的发生情况,并进一步选取自噬发生最明显的时间点。然后分别采用自噬抑制剂-3-MA、自噬激动剂-雷帕霉素（rapamycin）、Mdivi-1以及联合rapamycin和Mdivi-1进行干预,分别从mRNA以及蛋白水平检测自噬相关分子的改变,并同时检测神经元损伤情况。结果 OGD/R处理后,神经元自噬随再灌注时间增长而上调,在OGD 2 h/R 24 h时,Beclin 1以及微管相关轻链蛋白3 II/I（LC3 II/I）比值均达峰值（P<0.001,P<0.01）。细胞活力结果显示,rapamycin可减轻OGD/R损伤（P<0.01）,Mdivi-1则会加重OGD/R损伤（P<0.05）,但rapamycin可通过增加自噬来减轻Mdivi-1造成的损伤（P<0.05）。蛋白检测结果显示,OGD/R处理后,Mdivi-1可明显降低神... 

【文章来源】：中华神经外科疾病研究杂志. 2016,15(02)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    一、主要试剂及抗体
    二、小鼠原代皮层神经元培养
    三、OGD/R模型的制备
    四、细胞活力检测（ cell counting kit-8,CCK-8）
    五、实时定量PCR检测
    六、蛋白质免疫印迹检测（ Western blot）
    七、统计学处理
结果
    一、在原代培养的小鼠皮层神经元中,OGD/R处理后自噬发生上调
    二、线粒体分裂抑制剂通过抑制自噬发生,进而加重OGD/R损伤
讨论



本文编号：3077752