TBC1D15在胶质瘤细胞增殖和凋亡中的作用研究

发布时间：2021-03-25 01:08

　　背景:胶质瘤是最常见的原发性颅内恶性肿瘤。其中,胶质母细胞瘤约占所有胶质瘤的54%,约占高级别胶质瘤的60-70%。Ⅰ-Ⅱ级的胶质瘤患者生存时间为5-10年,间变性星形细胞瘤患者生存时间为2-3年,而胶质母细胞瘤患者的生存时间则只有12-15个月,5年生存率更是低至3%。虽然胶质瘤治疗的方式众多,包括常规的手术切除、放疗、化疗和近来年新出现的免疫疗法、电场疗法等,但是胶质瘤的治疗效果仍然不佳,过去几十年的研究仅仅使患者的中位生存时间延长了几个月。胶质瘤一直是中枢神经系统肿瘤研究的重点、热点和难点。目的:通过收集胶质瘤病人组织标本,运用Western Blot检测TBC1D15蛋白在胶质瘤组织标本中的表达,了解其在正常脑组织和胶质瘤中的差异表达,进一步观察TBC1D15蛋白对U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响以及探讨潜在的作用机制。方法:1、收集青岛大学附属医院神经外科2018年12月-2019年4月期间手术切除的胶质瘤组织标本24例和正常脑组织5例,通过Western Blot检测TBC1D15的蛋白表达情况;2、干扰效率检测:利用siRNA干扰技术,敲低U87细胞系中TBC1D15的表... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

正常脑组织和胶质瘤样本中TBC1D15的表达情况

结果132.siRNA转染后能够明显抑制TBC1D15蛋白表达为了抑制U87胶质瘤细胞中TBC1D15蛋白的表达，我们采用siRNA干扰的方式来实现，分别转染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA48小时后，我们提取TBC1D15-siRNA组和Control-siRNA组中胶质瘤细胞的蛋白，通过WesternBlot方法检测转染效率，结果显示利用TBC1D15-siRNA能够明显地降低U87胶质瘤细胞中TBC1D15的表达（图2）。图2.siRNA干扰效率检测注：转染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA48小时后，提取细胞蛋白，WesternBlot显示TBC1D15-siRNA能够明显的敲低TBC1D15的表达。

青岛大学硕士学位论文143.TBC1D15表达下调抑制U87胶质瘤细胞的增殖。为了观察TBC1D15对U87胶质瘤细胞增殖的影响，我们通过CCK-8实验加以检测。TBC1D15-siRNA和Control-siRNA转染U87胶质瘤细胞后，我们分别在24h、48h、72h时间点检测TBC1D15-siRNA组和Control-siRNA组在450nm波长的吸光度。通过比较TBC1D15-siRNA组和Control-siRNA组的吸光度，我们发现在敲低TBC1D15后24h、48h、72h胶质瘤细胞的增殖能力分别较对照组下降了24.7%、19.1%，16.9%。实验结果表明证明，敲低TBC1D15后，U87胶质瘤细胞的增殖能力明显受到抑制（P＜0.05）(图3)。图3.细胞增殖检测注：转染TBC1D15-siRNA和Control-siRNA后，分别在24h、48h、72h用CCK8实验检测其在450nm的吸光度，结果表明敲低TBC1D15能够抑制U87细胞的增殖（＊P＜0.05）。


本文编号：3098739