γ-氨基丁酸A受体激动剂对新生大鼠海马神经元癫痫样放电的影响

发布时间：2017-04-16 08:11

  本文关键词：γ-氨基丁酸A受体激动剂对新生大鼠海马神经元癫痫样放电的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过新生大鼠海马神经元体外癫痫样放电模型,探讨γ-氨基丁酸A受体(GABAa受体)激动剂(氯硝西泮、蝇蕈醇、异孕烷醇酮)对发育期海马神经元癫痫样放电的影响。评估γ-氨基丁酸(GABA)能神经元在中枢神经系统(CNS)发育早期介导的作用。方法:采用出生24小时内新生SD大鼠,取海马组织,通过胰酶消化,吸管吹打法制备海马神经元,置于培养箱中(37℃、5%CO2、95%O2、饱和湿度)培养至第9天。用“无镁细胞外液”孵育3小时,建立体外癫痫样放电模型,选择表面光滑、轮廓清楚、活性良好的神经元用于全细胞膜片钳记录。在形成高阻封接并破膜后,转换到电流钳模式下分别记录以上三种GABAa受体激动剂对新生大鼠海马神经元癫痫样放电的作用。结果:1、新生大鼠海马神经元癫痫样放电模型的建立:新生大鼠海马神经元培养至第9天,外形饱满,突起密集清晰并交织成密集的网络。海马神经元在无镁细胞外液中孵育3小时后,神经元兴奋性明显增加,出现自发的反复癫痫样放电。放电频率5-20Hz,幅度45-60Mv范围,恢复正常细胞外液后能持续稳定的放电。神经元癫痫样放电模型建立成功。2、GABAa受体激动剂的干预结果:(1)氯硝西泮干预:在新生大鼠海马神经元癫痫样放电模型中,氯硝西泮干预后与干预前相比,神经元癫痫样放电频率及放电幅度未见明显变化(p0.05)。(2)蝇蕈醇干预:蝇蕈醇干预后,神经元癫痫样放电的频率及放电幅度较干预前明显下降(p0.001)。(3)异孕烷醇酮干预:异孕烷醇酮干预后神经元癫痫样放电的频率及放电幅度较干预前明显下降(p0.001)。结论:(1)无镁细胞外液可以诱导新生大鼠海马神经元自发的反复癫痫样放电,建立稳定的癫痫样放电模型。(2)GABAa受体激动剂未加剧新生大鼠海马神经元癫痫样放电而是依然介导抑制作用。(3)氯硝西泮对新生大鼠海马神经元癫痫样放电未见明显的抑制作用,可能与未成熟脑相关受体表达不全、神经元持续自发放电GABA消耗殆尽及无镁细胞外液孵育降低GABA能神经元传导有关。(4)蝇蕈醇、异孕烷醇酮可以明显地抑制新生大鼠海马神经元的癫痫样放电,提示神经类固醇和其他GABA类似物在神经发育阶段对癫痫有一定的治疗作用。
【关键词】：新生大鼠 海马神经元 原代培养 膜片钳 癫痫样放电
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R742.1
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 实验流程图11-12
• 第一部分 新生大鼠海马神经元原代培养及新生大鼠海马神经元癫痫样放电模型的建立12-18
• 一、新生大鼠海马神经元原代培养12-14
• 二、新生大鼠海马神经元癫痫样放电模型的建立14-17
• 小结17-18
• 第二部分 GABAA受体激动剂对新生大鼠海马神经元癫痫样放电的影响18-24
• 实验材料18-19
• 实验方法19-20
• 数据整理和统计学分析20
• 结果20-23
• 小结23-24
• 讨论24-29
• 结论29-30
• 参考文献30-34
• 综述34-41
• 参考文献39-41
• 中英文对照缩略词表41-42
• 研究生期间发表的文章42-43
• 致谢43-44

【参考文献】

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1 汤继宏;朱玉霞;张兵兵;李岩;冯星;;新生期大鼠反复惊厥后海马区γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的改变及其意义[J];临床神经病学杂志;2014年05期

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本文编号：310382