FOXG1的表达与人恶性神经胶质瘤的相关性研究

发布时间：2017-04-16 08:20

  本文关键词：FOXG1的表达与人恶性神经胶质瘤的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:最近的证据表明,FOXG1表达的增加与肿瘤发生相关。本研究旨在探讨FOXG1在人类神经胶质瘤的表达及作用。方法:特定的短发卡RNA在神经胶质瘤细胞系下调FOXG1,FOXG1在增殖和凋亡的功能评估。我们通过免疫组织化学方法检测FOXG1在神经胶质瘤组织样本的表达。我们分析了FOXG1转导的FOXG1 shRNA的慢病毒通过Western印迹分析U118细胞FOXG1表达并观察一个显著抑制FOXG1表达。采用了膜联蛋白V/7-AAD染色流式细胞术进行测定凋亡率。RT-PCR检测两组中FOXG1的表达。结果:与对照组大脑组织相比,神经胶质瘤组织表现出明显高表达FOXG1。FOXG1与组织学恶性度呈正相关。为了确认在神经胶质瘤细胞的细胞凋亡的FOXG1功能,实验表明凋亡率在shFOXG1 U118细胞24小时(20.7%)和48小时(45.5%)相比,矢量控制组(1.1%和2.1%)相比显著升高。因此,我们的研究结果表明,FOXG1下调的U118细胞增殖和存活,并诱导凋亡作用,并具有统计学意义。U118细胞增殖是由于FOXG1干扰显著下降。这些结果表明,FOXG1蛋白可能参与细胞增殖和凋亡途径的调节。U118细胞的FOXG1表达在mRNA和蛋白水平相比于正常的人脑胶质细胞HEB具有较强的表达。结论:我们的结果表明,高表达的FOXG1转录因子高度表达在神经胶质瘤,并与组织学类型胶质瘤相关联。我们的研究结果还表明,高表达的FOXG1可促进神经胶质瘤细胞的增殖和存活。靶向FOXG1可能是一种有吸引力的检测和治疗脑胶质瘤方案。
【关键词】：FOXG1 胶质瘤 表达 凋亡
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 实验材料10-12
• 1.1 主要材料10-12
• 1.1.1 主要实验仪器10-11
• 1.1.2 菌株与细胞株11
• 1.1.3 主要实验试剂11-12
• 第二章 主要实验方法12-26
• 2.1 重组质粒的扩增、提取及鉴定12-14
• 2.1.1 重组质粒的扩增12
• 2.1.2 重组质粒的提取12-13
• 2.1.3 重组质粒的鉴定13-14
• 2.2 U118细胞的培养14-17
• 2.2.1 U118细胞的复苏15
• 2.2.2 U118细胞的培养与传代15
• 2.2.3 U118细胞的冻存15
• 2.2.4 U118细胞脂质体转染及转染效率的测定15-16
• 2.2.4.1 脂质体转染流程15-16
• 2.2.4.2 转染效率的测定16
• 2.2.5 G418筛选稳定转染细胞系16-17
• 2.2.5.1 确定G418最佳筛选浓度16
• 2.2.5.2 筛选稳定转染细胞系16-17
• 2.3 免疫组织化学17-18
• 2.4 RT-PCR反应18-20
• 2.4.1 总RNA提取19
• 2.4.2 反转录反应19-20
• 2.4.3 PCR反应20
• 2.5 MTT检测细胞增殖20-21
• 2.6 Western Blot21-24
• 2.6.1 提取细胞总蛋白21
• 2.6.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳21-22
• 2.6.3 电转印22-23
• 2.6.4 封闭23
• 2.6.5 孵育抗体23-24
• 2.6.6ECL化学发光24
• 2.7 功能检测24-25
• 2.7.1 U118细胞脂质体转染及稳定转染细胞系的建立24
• 2.7.2 采用RT-PCR和Western-Biot方法检各组细胞U118的表达24
• 2.7.3 MTT检测细胞增殖24
• 2.7.4 流式细胞术检测细胞凋亡24-25
• 2.8 统计学方法25-26
• 第三章 实验结果26-34
• 3.1 重组质粒的鉴定26
• 3.2 U118细胞的培养26
• 3.3 U118脂质体转染26-27
• 3.3.1 FOXG1干扰质粒U118细胞26-27
• 3.4 稳定转染U118细胞系的筛选27
• 3.5 MTT检测U118细胞增殖27-28
• 3.6 Western-Blot检测FOXG1的表达28-29
• 3.7 流式细胞术检测U118细胞凋亡29-30
• 3.8 RT-PCR检测FOXG1基因的表达30-31
• 3.9 免疫组化对FOXG1基因的检测表达31-34
• 讨论34-35
• 结论35-36
• 附录36-39
• 参考文献39-41
• 综述41-48
• 综述参考文献45-48
• 攻读学位期间的研究成果48-49
• 缩略语表49-50
• 致谢50-51

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈赞,杨立庄,叶伟,王伊龙,赵鹏,李永利,康军,郑永日,曹阳;神经胶质瘤细胞热休克蛋白抗原肽复合物的研究[J];中华实验外科杂志;2003年05期

2 陈赞 ,杨立庄 ,叶伟;神经胶质瘤细胞热休克蛋白抗原肽复合物的研究[J];哈尔滨医科大学学报;2003年05期

3 张玲华;;神经胶质瘤的诊断与治疗现状[J];实用医技杂志;2007年24期

4 周文光;李南华;王廷芳;;鼻内型神经胶质瘤一例[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;1990年02期

5 ;颅面神经胶质瘤[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;1997年02期

6 薛德麟,雷霆;要重视神经胶质瘤的治疗[J];中国临床神经外科杂志;2002年01期

7 肖敏 ,吴淼 ,曾冬竹 ,饶芸;树突状细胞瘤苗诱导的抗神经胶质瘤作用体外实验研究[J];现代医药卫生;2003年01期

8 戴捷,于\，

本文编号：310411