HER-2/neu小分子干扰RNA对脑膜瘤细胞增殖活性的影响
发布时间：2021-03-28 17:47
目的：本课题将化学合成的特异性HER-2/neu小分子干扰RNA（HER-2siRNA）瞬时转染至HER-2（人表皮生长因子受体-2）阳性的原代培养的人脑膜瘤细胞中，观察其对离体脑膜瘤细胞增殖活性的影响。方法：本课题收集外科手术切除的新鲜人脑膜瘤组织进行原代培养，用免疫细胞化学法筛选出HER-2抗体阳性的病例作为实验对象，然后将化学合成的特异性HER-2siRNA瞬时转染至体外培养的HER-2阳性的人脑膜瘤细胞，实验分为四组：特异性HER-2siRNA组；阴性对照siRNA组；脂质体组；细胞对照组。用MTT法直接测定转染前后脑膜瘤细胞增殖活性的改变；用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测转染前后脑膜瘤细胞中HER-2mRNA的水平；采用免疫细胞化学法（ICC）检测转染前后脑膜瘤细胞中HER-2蛋白的水平，以及反映细胞增殖活性的Ki-67蛋白水平；WesternBlot法检测转染前及转染后脑膜瘤细胞中HER-2蛋白的变化。探讨靶向阻断HER-2基因后脑膜瘤在细胞水平、RNA水平和蛋白水平表达的改变，从而观察HER-2基因与脑膜瘤生物学行为之间的关系。结果：特异性HER-2si...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阴性对照（20×）
3-4 荧光标记阴性对照 siRNA 转染效率（10×cently labeled negative control siRNA transfection A 转染前后脑膜瘤细胞的形态学观察早期阶段（原代至第四代），脑膜瘤细胞在，从圆形，双极性逐渐过渡至多极性，细两个，细胞伸出较多长的伪足，相互连接制及密度抑制消失，细胞相互堆积形成漩见形成一个个高密度的亮白小点（如图3-5间增加，脑膜瘤细胞开始出现衰老及凋亡伪足减少，包膜变平整光滑，双核细胞数渐增多（如图3-6）。
细胞核一个至两个，细胞伸出较多长的伪足，相互连接成网状，部分区域增殖旺盛，接触抑制及密度抑制消失，细胞相互堆积形成漩涡状，在倒置显微镜下观察，常常可见形成一个个高密度的亮白小点（如图3-5）。HER-2 siRNA转染后，随着培养时间增加，脑膜瘤细胞开始出现衰老及凋亡的征象，如细胞体积逐渐变大，细胞伪足减少，包膜变平整光滑，双核细胞数目减少，胞质内的颗粒物质及空泡逐渐增多（如图3-6）。3-4
【参考文献】：
期刊论文
[1]影响脑膜瘤复发及恶变的相关因素的研究进展[J]. 马金邦,张庆华,夏鹤春. 宁夏医学杂志. 2010(04)
[2]HER2状态与脑膜瘤分级及复发的相关性[J]. 王淳良,梅金红,王珊珊,徐姗,徐林林,熊一峰. 中华病理学杂志. 2010 (03)
[3]荧光原位杂交检测脑膜瘤中HER2基因状态[J]. 杨玄勇,王淳良,梅金红,徐姗,王珊珊. 中华实验外科杂志. 2009 (11)
[4]HER2、Ki-67、TK1蛋白在脑膜瘤中的表达[J]. 王珊珊,梅金红,王淳良,徐姗,徐林林,熊一峰,张宝红. 江西医学院学报. 2009(04)
[5]HER2与肿瘤浸润转移[J]. 王珊珊,梅金红. 生命的化学. 2008(05)
[6]人脑膜瘤细胞的原代培养[J]. 李军涛,杨卫忠,石松生,王春华,陈春美,方俊杰,杨永凯,蔡冬生. 福建医药杂志. 2008(04)
[7]脑膜瘤复发与微血管密度、血管内皮生长因子表达的关系[J]. 王淳良,梅金红,王珊珊,徐林林,秦兴义. 中华实验外科杂志. 2008 (06)
[8]RNA interference-mediated gene silencing of vascular endothelial growth factor in colon cancer cells[J]. Tie-Jun Li Kai Kang Bing-Qiang Zhang Cai-Quan Zhang,The First Affiliated Hospital,Chongqing University of Medical Sciences,Chongqing 400016,China Jian-Ning Song Shu-sheng Tong Zan-Lan Hu,The Ninth Hospital of Chongqing,Chongqing 400700,China Tong-Chuan He,Molecular Oncology Laboratory,University of Chicago Medical Center,IL 60637,United States. World Journal of Gastroenterology. 2007(40)
[9]RNAi technology: A Revolutionary tool for the colorectal cancer therapeutics[J]. Wei Lv, Chao Zhang, Jia Hao, Department of General Surgery, Southwest Hospital, The Third Military Medical University, Chongqing 400038, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(29)
本文编号：3105982
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阴性对照（20×）
3-4 荧光标记阴性对照 siRNA 转染效率（10×cently labeled negative control siRNA transfection A 转染前后脑膜瘤细胞的形态学观察早期阶段（原代至第四代），脑膜瘤细胞在，从圆形，双极性逐渐过渡至多极性，细两个，细胞伸出较多长的伪足，相互连接制及密度抑制消失，细胞相互堆积形成漩见形成一个个高密度的亮白小点（如图3-5间增加，脑膜瘤细胞开始出现衰老及凋亡伪足减少，包膜变平整光滑，双核细胞数渐增多（如图3-6）。
细胞核一个至两个，细胞伸出较多长的伪足，相互连接成网状，部分区域增殖旺盛，接触抑制及密度抑制消失，细胞相互堆积形成漩涡状，在倒置显微镜下观察，常常可见形成一个个高密度的亮白小点（如图3-5）。HER-2 siRNA转染后，随着培养时间增加，脑膜瘤细胞开始出现衰老及凋亡的征象，如细胞体积逐渐变大，细胞伪足减少，包膜变平整光滑，双核细胞数目减少，胞质内的颗粒物质及空泡逐渐增多（如图3-6）。3-4
【参考文献】：
期刊论文
[1]影响脑膜瘤复发及恶变的相关因素的研究进展[J]. 马金邦,张庆华,夏鹤春. 宁夏医学杂志. 2010(04)
[2]HER2状态与脑膜瘤分级及复发的相关性[J]. 王淳良,梅金红,王珊珊,徐姗,徐林林,熊一峰. 中华病理学杂志. 2010 (03)
[3]荧光原位杂交检测脑膜瘤中HER2基因状态[J]. 杨玄勇,王淳良,梅金红,徐姗,王珊珊. 中华实验外科杂志. 2009 (11)
[4]HER2、Ki-67、TK1蛋白在脑膜瘤中的表达[J]. 王珊珊,梅金红,王淳良,徐姗,徐林林,熊一峰,张宝红. 江西医学院学报. 2009(04)
[5]HER2与肿瘤浸润转移[J]. 王珊珊,梅金红. 生命的化学. 2008(05)
[6]人脑膜瘤细胞的原代培养[J]. 李军涛,杨卫忠,石松生,王春华,陈春美,方俊杰,杨永凯,蔡冬生. 福建医药杂志. 2008(04)
[7]脑膜瘤复发与微血管密度、血管内皮生长因子表达的关系[J]. 王淳良,梅金红,王珊珊,徐林林,秦兴义. 中华实验外科杂志. 2008 (06)
[8]RNA interference-mediated gene silencing of vascular endothelial growth factor in colon cancer cells[J]. Tie-Jun Li Kai Kang Bing-Qiang Zhang Cai-Quan Zhang,The First Affiliated Hospital,Chongqing University of Medical Sciences,Chongqing 400016,China Jian-Ning Song Shu-sheng Tong Zan-Lan Hu,The Ninth Hospital of Chongqing,Chongqing 400700,China Tong-Chuan He,Molecular Oncology Laboratory,University of Chicago Medical Center,IL 60637,United States. World Journal of Gastroenterology. 2007(40)
[9]RNAi technology: A Revolutionary tool for the colorectal cancer therapeutics[J]. Wei Lv, Chao Zhang, Jia Hao, Department of General Surgery, Southwest Hospital, The Third Military Medical University, Chongqing 400038, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(29)
本文编号：3105982
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3105982.html
最近更新
教材专著
