活化星形胶质细胞NGF、IL-6表达的时间特性
发布时间:2021-03-31 08:22
目的:研究星形胶质细胞活化后神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的时间规律性,探讨星形胶质细胞活化后启动保护性机制与损伤性机制的时间特性。方法:体外分离培养星形胶质细胞,分为对照组、活化组、抑制组。通过光学显微镜及免疫荧光化学观察各组细胞的形态变化;应用半定量RT-PCR方法分析各组细胞间胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA及NGF mRNA、IL-6 mRNA表达变化;用ELISA法检测各组细胞上清液中不同时间点(6h,24h,48h,72h)NGF、IL-6的含量。结果:活化组与对照组比较,细胞胞体变大,GFAP荧光增强;RT-PCR示GFAP mRNA、NGF mRNA、IL-6 mRNA表达均明显增高,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);ELISA法检测示星形胶质细胞活化后NGF分泌量在活化后24小时达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);活化后48小时IL-6的含量达到高峰,与对照组比较差异有显著性...
【文章来源】:现代生物医学进展. 2013,13(07)
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
对照组GFAP免疫荧光染色(400×)
髯橄赴?锨逡篍LISA法检测NGF、IL-6分泌量的时间变化规律三组均可见NGF、IL-6分泌;活化组NGF分泌量在活化后24小时达到高峰,到48小时分泌量下降,24小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点48小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01);活化组IL-6分泌量在活化后48小时达到高峰,到72小时分泌量下降,48小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点72小时与48小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6图2活化组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图3抑制组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图4各组GFAPRT/PCR时间点电泳图Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注:M:Marker;1:活化组72h;2:活化组48h;3:活化组24h;4:活化组6h;5:抑制组72h;6:抑制组48h;7:抑制组24h;8:抑制组6h;9:对照组72h;10:对照组48h;11:对照组24h;12:对照组6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.图5各组不同时间点GFAPmRNA表达Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注:*与对照组比较P<0.01;#与活化组比较P<0.01;§活化组6h与48h比较P<0.01;※活化组72h与48h比较P<0.01。Note:*P<0.01,
高峰,到48小时分泌量下降,24小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点48小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01);活化组IL-6分泌量在活化后48小时达到高峰,到72小时分泌量下降,48小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点72小时与48小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6图2活化组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图3抑制组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图4各组GFAPRT/PCR时间点电泳图Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注:M:Marker;1:活化组72h;2:活化组48h;3:活化组24h;4:活化组6h;5:抑制组72h;6:抑制组48h;7:抑制组24h;8:抑制组6h;9:对照组72h;10:对照组48h;11:对照组24h;12:对照组6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.图5各组不同时间点GFAPmRNA表达Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注:*与对照组比较P<0.01;#与活化组比较P<0.01;§活化组6h与48h比较P<0.01;※活化组72h与48h比较P<0.01。Note:*P<0.01,vsactivationgroupandcontrolgroup;#P<0.01,vscontrolgroupandactivationgroup;§P<0.01,vsactivationgroupat6handactiva
【参考文献】:
期刊论文
[1]星形胶质细胞活化与表皮生长因子受体表达的相关性研究[J]. 郭志慧,武衡. 中风与神经疾病杂志. 2010(08)
[2]神经生长因子联合神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤[J]. 范广明,张文彬,张赛,王丽君. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(14)
[3]睫状神经营养因子对体外培养星形胶质细胞的激活作用(英文)[J]. 吴艳,刘仁刚,周洁萍. Neuroscience Bulletin. 2006(06)
本文编号:3111120
【文章来源】:现代生物医学进展. 2013,13(07)
【文章页数】:6 页
【部分图文】:
对照组GFAP免疫荧光染色(400×)
髯橄赴?锨逡篍LISA法检测NGF、IL-6分泌量的时间变化规律三组均可见NGF、IL-6分泌;活化组NGF分泌量在活化后24小时达到高峰,到48小时分泌量下降,24小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点48小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01);活化组IL-6分泌量在活化后48小时达到高峰,到72小时分泌量下降,48小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点72小时与48小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6图2活化组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图3抑制组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图4各组GFAPRT/PCR时间点电泳图Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注:M:Marker;1:活化组72h;2:活化组48h;3:活化组24h;4:活化组6h;5:抑制组72h;6:抑制组48h;7:抑制组24h;8:抑制组6h;9:对照组72h;10:对照组48h;11:对照组24h;12:对照组6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.图5各组不同时间点GFAPmRNA表达Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注:*与对照组比较P<0.01;#与活化组比较P<0.01;§活化组6h与48h比较P<0.01;※活化组72h与48h比较P<0.01。Note:*P<0.01,
高峰,到48小时分泌量下降,24小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点48小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6小时与24小时比较差异有显著性(P<0.01);活化组IL-6分泌量在活化后48小时达到高峰,到72小时分泌量下降,48小时内随时间延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),时间点72小时与48小时比较差异有显著性(P<0.01),时间点6图2活化组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图3抑制组GFAP免疫荧光染色(400×)Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)图4各组GFAPRT/PCR时间点电泳图Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注:M:Marker;1:活化组72h;2:活化组48h;3:活化组24h;4:活化组6h;5:抑制组72h;6:抑制组48h;7:抑制组24h;8:抑制组6h;9:对照组72h;10:对照组48h;11:对照组24h;12:对照组6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.图5各组不同时间点GFAPmRNA表达Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注:*与对照组比较P<0.01;#与活化组比较P<0.01;§活化组6h与48h比较P<0.01;※活化组72h与48h比较P<0.01。Note:*P<0.01,vsactivationgroupandcontrolgroup;#P<0.01,vscontrolgroupandactivationgroup;§P<0.01,vsactivationgroupat6handactiva
【参考文献】:
期刊论文
[1]星形胶质细胞活化与表皮生长因子受体表达的相关性研究[J]. 郭志慧,武衡. 中风与神经疾病杂志. 2010(08)
[2]神经生长因子联合神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤[J]. 范广明,张文彬,张赛,王丽君. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(14)
[3]睫状神经营养因子对体外培养星形胶质细胞的激活作用(英文)[J]. 吴艳,刘仁刚,周洁萍. Neuroscience Bulletin. 2006(06)
本文编号:3111120
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