HDACi对脑缺血性卒中保护机制的研究

发布时间：2021-04-20 18:02

　　目的：探讨永久性阻塞模型（Permanent occlusion of the middle cerebral artery,p-MCAO）引起小鼠脑蛋白乙酰化修饰的变化以及损伤的机制，及组蛋白泛去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（trichostatin A,TSA）对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其作用的机制。方法：线栓法建立Balb/c小鼠脑缺血模型；通过神经功能学评分，脑水肿情况以及TTC染色来判断模型的成功与否；通过神经功能学评分的结果和脑梗死比例的减少来确定SAHA的体内用药浓度，Western blotting检测小鼠MCAO不同时间点脑蛋白乙酰化水平和精氨酸酶表达量的变化；1-640nmol·L-1TSA处理PC12细胞，噻唑蓝（MTT）检测对PC12细胞活性的影响；建立PC12细胞缺氧/缺糖（oxygen and glucose deprivation, OGD）损伤模型；Propidium iodide （PI）和Hoechst33258染色检测细胞凋亡与坏死；荧光显微镜检测各组细胞内线粒体膜电势的变化；荧光显微镜与流式细胞仪检测各组细胞活性氧... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
    一 脑缺血的病理生理研究
        1 能量代谢障碍
        2 兴奋性氨基酸的神经毒性
        3 Ca 离子超载
        4 NOS,ROS 损伤
    二 表观遗传，HATs/HDACs 与乙酰化生物学
    三 乙酰化动态平衡（acetylation homeostasis）与去乙酰化酶抑制剂（HDACi）与能量代谢
    四 乙酰化动态平衡（acetylation homeostasis）与去乙酰化酶抑制剂（HDACi）对卒中神经保护的作用
    五 课题设计思路和意义
第一章 小鼠脑缺血模型损伤的建立以及损伤机制探索
    材料与方法
    实验结果
        1 评价 MCAO 模型成功与否
        2 BCA 定量结果
        3 western blot
    讨论
第二章 TSA 对缺糖/缺氧损伤 PC12 细胞的保护作用
    材料与方法
        细胞
        主要试剂与试剂盒
        主要仪器
        主要试剂的配置
        细胞培养及处理
        统计分析
    实验结果
        1 PC12 细胞形态
        2 TSA 对 PC12 细胞增殖活性的影响
        3 PC12 细胞缺糖/缺氧损伤模型的建立
        4 利用 PI 和 Hochest 染色检测细胞凋亡与坏死
        6 TSA 对 PC12 细胞 OGD 损伤模型的保护作用
        7 检测细胞内活性氧含量
        8 检测细胞内线粒体膜电位变化
        9 细胞经不同处理，Western blotting 分析乙酰化蛋白的表达结果
    讨论
参考文献
在学期间发表论文
致谢
英文缩略词


【参考文献】：
期刊论文
[1]Energy Metabolism Disorder and Myocardial Injury in Chronic Myocardial Ischemia with Qi Deficiency and Blood Stasis Syndrome Based on 2-DE Proteomics[J]. 王勇,啜文静,李春,郭淑贞,陈建新,余俊达,王伟.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2013(08)
[2]小胶质细胞与脑缺血关系的研究进展[J]. 泰文娇,叶旋,鲍秀琦,王晓良,张丹.  药学学报. 2012(03)
[3]大蒜多糖抗氧化活性及其对PC12细胞增殖的影响[J]. 郑颖,王辉,郭国庆,黄雪松,沈伟哉.  暨南大学学报(医学版). 2008(02)
[4]Neuroprotective effects of scutellarin on rat neuronal damage induced by cerebral ischemia/reperfusion[J]. Xia-min HU~(1,3) Mi-mei ZHOU~1 Xian-min HU~1 Fan-dian ZENG~2 1 Department of Pharmacology,Medical College of Wuhan University of Science and Technology,Wuhan 430080,China;2 Institute of Clinical Pharmacology,Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430080,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2005(12)
[5]脑缺血损伤的分子机制研究进展[J]. 颜建云,吴伟康.  中国病理生理杂志. 2003(03)

硕士论文
[1]黄连素对脑缺血再灌注小鼠损伤和免疫系统的影响[D]. 宋兵.暨南大学 2009



本文编号：3150145