α-突触核蛋白聚集及传播模型的构建

发布时间：2021-04-21 10:59

　　目的建立α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）聚集及传播的细胞和动物模型,为帕金森病的发病机制研究提供基础。方法亲和层析法纯化α-syn蛋白,体外诱导其聚集成为α-syn纤维（Preformed fibrils,PFFs）;培养稳定表达GFP-α-syn的HEK293细胞系及原代神经元,转导α-synPFFs后免疫荧光染色法观察细胞内α-syn聚集情况;小鼠立体定位注射α-syn PFFs,免疫组织化学法检测内源性α-syn的聚集及传播情况。结果纯化的α-syn可在体外聚集形成聚集体;在细胞及动物水平观察到α-syn PFFs可诱导内源性蛋白的聚集和传播。结论本研究建立了α-syn聚集及传播的细胞和动物模型,为帕金森病的相关研究打下了基础。 

【文章来源】：卒中与神经疾病. 2020,27(06)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物及分组
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 α-syn纯化及纤维制备
    1.4 α-syn PFFs转导及细胞免疫荧光
    1.5 Western Blot及考马斯亮蓝染色
    1.6 透射电镜
    1.7 小鼠脑立体定位注射
    1.8 小鼠灌注取材及免疫组织化学染色
    1.9 小鼠原代神经元培养
2 结 果
    2.1 α-syn的纯化及体外聚集
    2.2 α-syn PFFs诱导细胞内α-syn发生聚集
    2.3 α-syn PFFs诱导小鼠脑内α-syn聚集
3 讨 论



本文编号：3151638