CMT2L小鼠的基因诊断及坐骨神经的HSPB8与HSPB1共定位分析

发布时间：2021-04-24 02:49

　　目的HSPB8为CMT2L的致病基因,我们意图通过携带K141N突变的HSPB8转基因小鼠模型上进行超微病理学研究,观察K141NHSPB8转基因小鼠模型中HSPB8是否与HSPB1存在共定位。方法pCAGGS-K141NHSPB8转基因小鼠传代并经PCR基因鉴定,取pCAGGS-K141NHSPB8转基因小鼠与正常小鼠坐骨神经,应用免疫组织化学双重标记染色后,在电镜下观察HSPB8、HSPB1的共定位情况。结果（1）转基因小鼠经基因诊断确定HSPB8基因存在423G→T的错义突变。（2） pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠10nm标记的HSPB8蛋白颗粒表达较多,20nm标记的HSPB1蛋白表达增多,且HSPB8与HSPB1两种蛋白之间存在着良好的共定位。结论（1）证实pCAGGS-K141NHSPB8转基因小鼠模型的成功构建,并顺利传代至F7代。（2） HSPB1可能参与了HSPB8在pCAGGS-K141NHSPB8转基因模型小鼠的致病过程。 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要药品及试剂、试剂盒
        2.1.3 主要仪器与设备
        2.1.4 引物
    2.2 方法
        2.2.1 试剂配制
        2.2.2 实验相关容器处理
K141NHSPB8转基因小鼠模型传代和基因诊断">        2.2.3 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8转基因小鼠模型传代和基因诊断
K141NHSPB8转基因小鼠HSPB8、HSPB1共定位分析">        2.2.4 正常小鼠与pCAGGS-HA-^K141NHSPB8转基因小鼠HSPB8、HSPB1共定位分析
第三章 结果
K141NHSPB8转基因小鼠模型传代和基因诊断">    3.1 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8转基因小鼠模型传代和基因诊断
K141NHSPB8转基因小鼠模型F2、F3、F4、F5、F6、F7代小鼠的基因诊断">        3.1.1 pCAGGS-HA-^K141NHSPB8转基因小鼠模型F2、F3、F4、F5、F6、F7代小鼠的基因诊断
        3.1.2 HSPB8、HSPB1免疫双标电镜共定位分析
第四章 讨论
    4.1 研究背景和前期工作
    4.2 转基因小鼠坐骨神经的HSPB8、HSPB1共定位分析
    4.3 存在的问题与展望
第五章 结论
主要参考文献
综述 腓骨肌萎缩症的治疗研究进展
    参考文献
致谢
作者攻读硕士学位期间的主要研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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[3]热激蛋白对细胞凋亡的调节作用[J]. 秦佳,杨金莹,伊淑莹,刘箭.  生命科学. 2007(02)
[4]轴突型腓骨肌萎缩症2L型致病基因HSPB8突变导致细胞内聚集物形成的机理研究[J]. 张如旭,唐北沙,资晓宏,夏昆,潘乾,张付峰,李书剑,赵国华,郭科.  中华医学遗传学杂志. 2006(06)
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博士论文
[1]HSP22转基因小鼠模型的建立[D]. 张付峰.中南大学 2008



本文编号：3156527