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胶质瘤相关抗原MAGE-D4 T细胞抗原肽的预测和鉴定

发布时间:2021-04-24 20:05
  目的:预测胶质瘤相关抗原MAGE-D4的HLA-A2限制性T细胞抗原肽,分析这些抗原肽负载DC后是否能诱导出具有肿瘤杀伤作用的T细胞,为MAGE-D4的胶质瘤免疫治疗提供实验依据。方法:(1)MAGE-D4表位肽的预测:利用SYFPEITHI和BIMAS网站,分析HLA-A*0201限制性MAGE-D4 T细胞抗原肽,筛选高得分的候选肽;(2)肽-HLA-A2亲和力检测:合成筛选出的抗原肽,将抗原肽与T2细胞孵育,流式细胞仪检测HLA-A2表达荧光强度,分析抗原肽肽与HLA-A2的亲和力;(3)HLA-A*0201表型的筛选鉴定:提取胶质瘤细胞U87的DNA,用HLA-A*0201特性引物进行PCR鉴定;分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪筛选HLA-A2健康志愿者。(4)树突状细胞(DC)的体外诱导培养及鉴定:分离HLA-A*0201健康志愿者的外周血PBMC,使用磁珠分选法从PBMC中分离出CD14+细胞,将用细胞因子(rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-a)与CD14+细胞孵育,诱导出成熟的DC,并通过形态学观察、细胞表面标志物(CD83,CD80,CD1... 

【文章来源】:广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】:76 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
英文缩略词索引
摘要
ABSTRACT
前言
绪论
实验设计方案
材料方法
结果
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗体的制备和应用[J]. 贺菽嘉,顾永耀,肖绍文,张庆梅,陈芳,罗彬,付骏,谢小薰.  细胞与分子免疫学杂志. 2017(01)
[2]A Simplified PCR-SSP Method for HLA-A2 Subtype in a Population of Wuhan,China[J]. Bing Liang1, Lijun Zhu1, Zhihui Liang1, Xiufang Weng1, Xiaoling Lu1, Cai’e Zhang1, Hui Li1 and Xiongwen Wu1, 21Department of Immunology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science & Technology, Wuhan, China;.  Cellular & Molecular Immunology. 2006(06)
[3]HLA-A02基因型与中国高发区肝细胞癌的密切关联[J]. 明利华,朱源荣,王晓宏,吴志远,孙宗棠.  中国免疫学杂志. 1999(07)
[4]北方汉族人群HLA-A2亚型分布及p53的合成肽体外诱导CTL反应[J]. 侯亚非,孙宗棠,曲春枫,吴志远.  中华微生物学和免疫学杂志. 1999(01)
[5]黑色素瘤抗原-D4在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义[J]. 马勤运,陈志明,庞烈文,朱勇俊,陈刚,陈佶.  中华实验外科杂志. 2012 (03)



本文编号:3157993

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