脊髓星形胶质细胞中CXCL1参与神经病理性疼痛调节的机制研究

发布时间：2021-04-29 07:25

　　近年来的研究表明，中枢神经系统除神经元之外，神经元周围的胶质细胞（星形胶质细胞和小胶质细胞）在慢性疼痛的产生和维持中发挥着不可忽视的作用。胶质细胞在被激活的情况下，还能作为免疫反应细胞，产生一些信号分子，参与对神经元功能的调节。在胶质细胞产生的信号分子中，细胞因子（cytokines）和趋化因子（chemokines）是参与慢性疼痛调节的重要物质之一。本实验研究了脊神经结扎（SNL）后脊髓中趋化因子CXCL1在神经病理性疼痛中的作用及机制。方法：1.结扎小鼠的左侧L5脊神经（spinal nerve ligation, SNL）诱发神经病理性疼痛模型。2.用行为学检测来判断小鼠的机械性触诱发痛和热痛觉过敏的程度。3.用Real-time PCR法检测CXCL1mRNA和TNF-α mRNA的表达。4.免疫荧光染色检测CXCL1、GFAP、OX-42、IBA1、CXCR2、pERK、c-Fos的免疫阳性细胞变化情况。用免疫荧光双标染色来定位表达CXCL1、CXCR2、pERK、c-Fos的细胞类型。5.用western blot方法检测CXCR2蛋白含量变化情况。6.用原位杂交和免疫荧光... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
材料与方法
    1. 材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
        1.4 溶液配制
    2. 方法
        2.1 脊神经结扎（Spinal Nerve Ligation, SNL）神经病理性疼痛模型的建立
        2.2 行为学检测
        2.3 星形胶质细胞的体外培养
        2.4 组织和细胞的免疫荧光染色
        2.5 原位杂交检测
        2.6 组织和细胞的 ELISA 检测
        2.7 Real-time RT-PCR
        2.8 Western blot
        2.9 鞘内注射药物
        2.10 图像数据的处理及统计分析
结果
    1. SNL 神经病理性疼痛模型的建立及行为学检测
        1.1 脊神经结扎（SNL）手术不影响小鼠的生长发育
        1.2 SNL 手术后小鼠运动协调能力不受影响
        1.3 SNL 诱发小鼠同侧后爪产生了神经病理性疼痛
    2. SNL 诱导脊髓星形胶质细胞表达 CXCL1
        2.1 SNL 后脊髓中 CXCL1 mRNA 表达增加
        2.2 SNL 后同侧脊髓背角中 CXCL1 蛋白表达增加
        2.3 SNL 诱导脊髓 CXCL1 表达的细胞类型
        2.4 SNL 诱导激活同侧脊髓的星形胶质细胞和小胶质细胞
        2.5 SNL 后脊髓 CXCL1 的表达和激活的星形胶质细胞和小胶质细胞相关性分析
    3. 星形胶质细胞通过 TNF-α—JNK 信号通路表达 CXCL1
        3.1 SNL 诱导脊髓 TNF-α mRNA 和 CXCL1 mRNA 表达相继增加
        3.2 抑制 TNF-α的功能缓解神经病理性疼痛的产生并减低 CXCL1 mRNA 的表达
        3.3 TNF-α鞘内注射诱导脊髓 CXCL1 表达升高
        3.4 JNK 信号通路介导 TNF-α引起的 CXCL1 表达上调
        3.5 鞘内注射 CXCL1 中和性抗体部分逆转 SNL 诱导的机械性触诱发痛和热痛觉过敏
    4. CXCL1 增强脊髓背角神经元兴奋性在神经病理性疼痛的易化中发挥作用
        4.1 鞘内注射 CXCL1 蛋白多肽诱发热痛觉过敏
        4.2 鞘内注射 CXCL1 蛋白多肽能兴奋脊髓背角神经元
        4.3 CXCR2 表达于脊髓神经元
        4.4 SNL 诱导脊髓 CXCR2 表达增加
        4.5 鞘内注射 CXCR2 拮抗剂部分逆转 SNL 诱导的机械性触诱发痛和热痛觉过敏
讨论
    1. 神经病理性疼痛模型的选择
    2. SNL 后脊髓星形胶质细胞上调表达 CXCL1 与神经病理性疼痛
    3. 星形胶质细胞通过 TNF-α—JNK 信号通路上调表达 CXCL
    4. CXCL1-CXCR2 参与神经病理性疼痛的中枢敏化
结论
参考文献
综述
    参考文献
英文缩写词表（Abbreviation）
博士生期间完成的论文
博士生期间承担科研项目情况
博士生期间科研获奖情况
博士生期间参编教材情况
博士生期间参加学术会议情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]SNL大鼠CD4+T细胞脊髓浸润及其分子机制研究[J]. 孙彩霞,刘嫣方,周成林,陈盼,张盼,苏兆亮,朱琛平,王胜军,许化溪.  细胞与分子免疫学杂志. 2011(12)



本文编号：3167107