多形性胶质母细胞瘤细胞高亲和力高特异性核酸适配体的筛选

发布时间：2021-05-09 05:19

　　目的：利用Cell-SELEX技术，体外筛选得到可以特异性识别人多形性胶质母细胞瘤细胞的核酸适配体。方法：利用化学方法人工合成长度为84个碱基的随机寡核苷酸库，以人工培养的人多形性胶质母细胞瘤细胞系U118-MG细胞为靶细胞，以人正常神经胶质细胞系SVGp12细胞为反筛细胞，利用Cell-SELEX技术，筛选得到可以特异性结合U118-MG细胞的核酸适配体，并利用流式细胞术以及激光共聚焦显微镜等技术对所得适配体的生物性能进行表征。结果：1、经过30轮的筛选得到了两条名为GBM128和GBM131的核酸适体。这两条适体可特异性地与U118-MG细胞结合。2、两条适体在复杂体系中仍能很好的与靶细胞结合，而且其靶标是位于靶细胞表面的某种蛋白质成分。3、两条适配体可以很好地与人脑胶质瘤组织结合，而不与正常的人脑胶质组织相结合。结论：筛选得到的核酸适配体GBM128和GBM131可以特异性的结合于靶细胞表面的靶标蛋白分子，为适配体在寻找胶质瘤的生物标志物，以及胶质瘤的分子成像、靶向载药、术中导航等研究领域的应用奠定了基础。 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
前言
第一章 多形性胶质母细胞瘤核酸适体的筛选
    1.1 引言
    1.2 实验材料
    1.3 实验方法
        1.3.1 U118-MG 细胞和 SVGp12 细胞的培养
        1.3.2 U118-MG 细胞核酸适配体的筛选
        1.3.3 克隆与测序
        1.3.4 带荧光标记 DNA 链的合成
        1.3.5 流式细胞分析法
    1.4 结果
        1.4.1 U118-MG 细胞核酸适配体的筛选
        1.4.2 克隆与测序
        1.4.3 流式细胞分析法
    1.5 讨论
第二章 核酸适配体 GBM128 和 GBM131 生物性能的表征
    2.1 引言
    2.2 实验材料
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 带荧光标记核酸适体的合成
        2.3.3 流式细胞分析法
        2.3.4 激光共聚焦显微镜分析法
        2.3.5 适配体对临床组织标本的结合能力检测
    2.4 结果
        2.4.1 流式细胞分析法
        2.4.2 激光共聚焦显微镜分析法
        2.4.3 适配体对临床肿瘤标本的检测
    2.5 讨论
第三章 结论与展望
参考文献
致谢
综述 核酸适配体及其在生物医学领域中的应用
    参考文献



本文编号：3176699