体外新生大鼠海马缺氧缺血模型中自噬相关分子的表达及Ca-A/K通道在自噬中的作用机制

发布时间：2021-05-10 09:37

　　目的:通过新生大鼠缺氧缺血性损伤模型,了解海马神经元的损伤情况,以及损伤后不同时间点及各组间细胞自噬变化和Ca-A/K通道亚基情况,并初步研究缺氧缺糖后Ca-A/K通道亚基变化与自噬的关系。方法:采用新生SD大鼠进行海马细胞原代培养,行氧糖剥夺处理方法,模拟神经元缺氧缺血模型。选0h、6h、12h、24 h、48h、72 h、96 h七个时间点,通过Western blot及RT-qPCR法测定氧糖剥夺前后LC-3、Beclin-1、mRNA的变化和Ca-A/K通道亚基的蛋白变化;透射电镜下检测自噬的特异性结构;CCK8法检测细胞活性,Fluo-3AM流式检测缺氧缺血后Ca2+i的水平变化,3-MA干预后,初步探讨自噬和Ca-A/K通道的关系及可能机制。结果:1、电镜结果,缺氧缺糖后神经元细胞浆内有大量自噬体形成;预先采用3-MA干预的细胞组也有自噬体形成,但比缺氧缺糖组明显降低。2、RT-qPCR结果,缺氧缺糖组0.5h和1h组LC3、Beclin-1均表达上升,缺氧缺糖0.5h组在0h表达就开始上升,48h达到高峰后开始下降。缺氧缺糖1h组则72h达到高峰后下降,且比缺氧缺糖0.5... 

【文章来源】：2015年泛长三角围产医学学术年会暨浙江省围产医学学术年会论文汇编浙江省科学技术协会会议论文集

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本文编号：3179137