scFvCD20负载antagomiR155治疗EAMG的实验研究

发布时间：2021-05-16 07:11

　　第一部分scFvCD20负载antagomiR155的构建及其对电鳗AchR刺激C57BL/6小鼠B细胞的影响目的：构建scFvCD20单链抗体并负载antagomiR155,观察其对电鳗AchR刺激C57BL/6小鼠B细胞增殖、成熟及抗AchR特异性抗体分泌的影响。方法：根据Genebank小鼠CD20基因信息,设计末端带有半胱氨酸残基的小鼠CD20单链抗体即scFvCD20cys,通过商品化偶联肽段cys-9R与miR155拮抗剂即antagomiR155偶联,同时针对antagomiR155设计对照antagomiRNA;免疫磁珠分选小鼠脾脏T细胞和B细胞,首先在B细胞的培养基中加入FITC标记的scFvCD20偶联的antagomiR155,培养后流式检测B细胞对其摄取率,荧光定量PCR检测B细胞miR155的表达水平；验证其有效性；然后将分选的小鼠脾脏T细胞和B细胞按照1：3的比例共培养,在培养基中加入电鳗AchR（Torpedo AchR, T-AchR）,分为空白组、实验组和对照组,在实验组中加入scFvCD20偶联的antagomiR155,而在对照组中加入对照anta... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
    参考文献
第一部分 SCFVCD20负载ANTAGOMIR155的构建及其对电鳗ACHR刺激C57BL/6小鼠B细胞的影响
    技术路线
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
第二部分 SCFVCD20负载ANTAGOMIR155治疗EAMG的疗效观察
    技术路线
    1 实验材料
    2 实验流程
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
第三部分 MIR155在MG患者PBMCS中的表达研究
    技术路线
    1 研究对象
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
综述
    参考文献
个人简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Small but influential:the role of microRNAs on gene regulatory network and 3′UTR evolution[J]. Rui Zhang a, b, Bing Su a, a State Key Laboratory of Genetic Resources and Evolution, Kunming Institute of Zoology and Kunming Primate Research Center, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650223, China b Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China.  遗传学报. 2009(01)



本文编号：3189230