p38γ在人脑星形细胞瘤中的表达及生物学意义的研究

发布时间：2021-05-16 10:08

　　背景：作为最常见的神经上皮性肿瘤,星形细胞瘤通常具有无限增殖和侵袭性生长的特点,尽管目前已有多种治疗手段,但该病的整体预后仍欠佳,因而仍有必要深入研究其肿瘤发生发展的分子机制以寻找新的有效治疗靶点。p38γ是p38MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）的四个亚型之一,正常情况下仅表达于骨骼肌组织。近年来的一些研究发现p38γ可能参与一些潜在的细胞恶性转化的调节过程,表明其在肿瘤的发生和进展过程中潜在的致瘤性,但具体作用机制仍然不明。目前国内外尚未有研究揭示p38γ在人脑星形细胞瘤组织中的表达情况及其对肿瘤生物学行为的影响。目的：探讨p38γ在人脑星形细胞瘤组织中的表达情况及与各项临床病理指标的关系。构建沉默人p38γ基因表达的siRNA序列并筛选出有效siRNA序列,为后续体外实验研究p38γ的生物学功能提供基础。探讨p38γ对胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等多种生物学特性的影响及相关的作用机制。方法：标准化采集61例人星形细胞瘤和5例非肿瘤性脑组织标本,分别用Western blot及免疫组化法检测前述标本中p38γ和hTERT蛋白的表达差异,分析p38γ表达水平与星形细胞瘤患者各项临床病... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文縮略词表
引言
    1.研究背景
    2.主要研究思路和研究内容
第一部分：p38γ在人脑星形细胞瘤中的表达
    前言
    第一章 Western blot检测p38γ蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达
        材料与方法
            1. 研究对象
            2. 主要实验器材及试剂
            3. 实验方法
            4. 统计学分析
        结果
            1. Western blot检测p38γ及hTERT蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达
            2. 人脑星形细胞瘤中p38γ蛋白的表达与临床病理指标的关系
    第二章 免疫组化检测p38γ蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达
        材料与方法
            1. 研究对象与分组
            2. 主要实验器材及试剂
            3. 实验方法
            4. 统计学分析
        结果
            1. 人脑星形细胞瘤常规病理组织学结果
            2. 免疫组化检测p38γ及hTERT蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达
    讨论
    小结
第二部分：p38γ基因siRNA的构建及有效靶点筛选
    前言
    材料与方法
        1. 主要实验器材及试剂
        2. 实验方法
        3. 统计学分析
    结果
        1. p38γ蛋白在人胶质瘤U251细胞株中的表达
        2. 倒置荧光显微镜观察转染效率
        3. 荧光定量Real time-PCR检测转染后p38γ mRNA的变化
        4. siRNA在翻译水平抑制人胶质瘤U251细胞p38γ蛋白的表达
    讨论
    小结
第三部分：siRNA沉默p38γ基因对U251细胞生物学行为的影响及相关机制
    前言
    第一章 siRNA沉默p38γ基因对U251细胞增殖、凋亡的影响及相关机制
        材料与方法
            1. 主要实验器材及试剂
            2. 实验方法
            3. 统计学分析
        结果
            1. CCK-8法检测细胞增殖活力
            2. 细胞凋亡检测
            3. 端粒酶活性检测(TRAP-PCR银染法)
            4. hTERT蛋白表达检测(Western Blot)
            5. Caspase-3/-9酶活性检测
    第二章 siRNA沉默p38γ基因对U251细胞迁移、侵袭的影响及相关机制
        材料与方法
            1. 主要实验材料及试剂
            2. 实验方法
            3. 统计学分析
        结果
            1. 细胞迁移实验
            2. 细胞侵袭实验
            3. 细胞骨架免疫荧光染色
            4. Western Blot检测MMP-2/-9蛋白表达
    讨论
    小结
全文结论
参考文献
本课题的创新点
综述
    参考文献
攻读学位期间主要的研究成果
致谢



本文编号：3189504