miR-410对胶质瘤及RANK蛋白对破骨细胞影响的初步研究

发布时间：2021-05-24 03:22

　　MicroRNAs是一类由21～25个核苷酸构成的内源性非编码单链小分子RNA，在生命个体凋亡，增殖，生长发育和分化等方面发挥重要的调节作用。已有结论证实，MicroRNAs在人类的肿瘤中可以扮演原癌基因或者抑癌基因的角色。MET mRNA编码的细胞跨膜蛋白是一类酪氨酸激酶受体，配体是肝细胞生长因子。当肿瘤细胞MET受体活化时，可以引起肿瘤细胞的的恶性程度增强，抑制肿瘤细胞凋亡。以上协同作用促进了肿瘤细胞的侵袭性生长。既往的肿瘤（包括胶质瘤）研究结论证实，MET基因表达和正常组织存在明显差异。应用计算机技术和表达分析，确定miR-410的序列和MET mRNA3’UTR部分序列相匹配。前期获得的人类胶质瘤标本检测也证实miR-410和MET表达量呈现负相关性。在胶质瘤中，荧光素酶和蛋白分析证实miR-410直接靶向作用于MET。miR-410表达量升高时，明显抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。在此基础上，还证实miR-410发挥作用机制主要是通过影响了MET诱导的AKT信号通路。miR-410靶向作用于MET和MET沉默及被敲除后发挥的作用类似。miR-410主要是直接靶向作用于原癌基因MET... 

【文章来源】：哈尔滨医科大学黑龙江省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
1. 文献综述
2. 前言
3、miR-410 靶向作用 MET 对胶质瘤增殖和侵袭的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
            3.1.1.1 人类胶质瘤标本
            3.1.1.2 胶质瘤细胞系
            3.1.1.3 实验动物
            3.1.1.4 所需试剂
            3.1.1.5 主要仪器
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 肿瘤细胞系培养
            3.1.2.2 细胞转染
            3.1.2.3 总 RNA 提取
            3.1.2.4 RT-Real time PCR 检测 miR-410
            3.1.2.5 原位杂交法检测 miRNA-410
            3.1.2.6 miRNA-410 的生物学分析
            3.1.2.7 平板克隆法分析细胞增殖活性
            3.1.2.8 流式细胞仪检测细胞周期
            3.1.2.9 Transwell 实验检测肿瘤细胞的侵袭能力
            3.1.2.10 荧光素酶报告载体的构建
            3.1.2.11 荧光素酶真核表达载体的构建
            3.1.2.12 Western blot 检测蛋白的变化
            3.1.2.13 体内试验部分
            3.1.2.14 免疫组织化学检测
            3.1.2.15 统计学处理
    3.2 结果
    3.3 讨论
4、RANK 蛋白对破骨细胞活性的影响
    4.1 材料和方法
    4.2 结果
    4.3 讨论
5、结论
6、致谢
7、参考文献
8、个人简历
9、附图



本文编号：3203457