Nrf2在神经胶质瘤细胞增殖中的作用

发布时间：2021-06-13 14:01

　　背景和目的：脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,因其浸润性生长且容易复发,手术、放疗、化疗等治疗措施疗效均不十分理想。理论上讲肿瘤的发生涉及多种癌基因和抑癌基因的突变,因此,阐明其分子生物学发病机理、寻求最新的生物学标记物及治疗靶标以提高疗效已成为当前的重大课题。近来发现rf2介导的细胞能量代谢在肿瘤细胞的增殖中起着重要作用,本课题旨在以恶性程度较高的U87细胞为模型,初步探讨Nrf2在神经胶质瘤细胞增殖及对化疗药物敏感性中的作用。方法：（1）用实时荧光定量PCR检测Nrf2在神经胶质瘤细胞U87中的表达量；（2）设计并合成能特异性针对Nrf2基因的反义寡核苷酸片段及对照,用脂质体将反义寡核苷酸片段转染U87细胞,westernblot实验检测干扰效果,MTS试验观察Nrf2干扰后细胞的增殖能力及对化疗药物替尼泊甙（VM-26）敏感性的影响；（3）实时荧光定量PCR和western blot检测Nrf2干扰后G6PD、PGD及TKT的表达情况；（4）设计并合成特异性针对G6PD和TKT的反义寡核苷酸片段,用脂质体转染U87细胞后,Western blot检测G6PD和TKT的蛋白表... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
1 前言
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞系及细胞培养相关试剂
        2.1.2 实时定量PCR相关试剂
        2.1.3 Western blotting试剂
        2.1.4 主要实验仪器
        2.1.5 试剂的配制
    2.2 方法
        2.2.1 细胞的复苏、传代、冻存
        2.2.2 细胞增殖实验
        2.2.3 细胞药物敏感性实验(MTS试验)
        2.2.4 实时定量PCR(Real-time PCR,qRT-PCR)
        2.2.5 设计购买siRNA
        2.2.6 siRNA干扰实验
        2.2.7 Western blot
    2.3 统计学分析
3 结果
    3.1 Nrf2在神经胶质瘤U87细胞的表达量较高
    3.2 下调Nrf2的表达能抑制神经胶质瘤U87细胞的增殖并增加药物敏感性
    3.3 下调Nrf2的表达能抑制G6PD、PGD和TKT的表达
    3.4 下调G6PD和TKT的表达能抑制U87细胞的增殖,并增加化疗敏感性
4 讨论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3227664