Sonic hedgehog（Shh）对大鼠永久性脑缺血的潜在治疗作用及机制研究

发布时间：2021-06-16 09:04

　　目的：研究Shh蛋白对大鼠永久性脑缺血模型的保护作用及其潜在机制。方法：原代大鼠脑微血管内皮细胞1-2代后，应用糖氧剥夺模拟体外缺血模型，分别给予rHu Shh、Cyclopamine预处理，选取2小时、4小时或6小时三个作用时间点为检测终点，用MTT法或BrdU染色法检测细胞存活和细胞增殖；建立大鼠永久性脑缺血模型，侧脑室注射rHu Shh或PBS，观察神经行为学评分，应用TTC法检测脑梗塞面积，干湿称重法检测脑水肿，依文思蓝外渗法检测血脑屏障通透性，激光散斑衬比技术检测皮层血流灌注，免疫组织化学法检测缺血梗塞区边缘CD31和α-SMA的阳性表达，用CD31和Ki-67两种抗体进行免疫荧光双标，用共聚焦显微镜观察缺血梗塞区边缘内皮细胞增殖状况。应用实时荧光定量PCR的方法检测Sonic hedgehog（Shh）信号通路中的关键成份（Shh，Patched-1，Gli-1）及血管新生因子（VEGF、Ang-1和Ang-2）的mRNA水平，用免疫印迹法（Western blotting）检测上述因子的蛋白水平。结果：1)rHu Shh可促进OGD处理下原代培养的脑微血管内皮细胞的存活和... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

与1B原代培养的脑微血管内皮细胞的鉴定：1A:相差显微镜下观察脑微血管内皮细胞；1B：免疫荧光染色示VIII因子表达阳性，DAPI染细

CWesternblotting显示Shh信号通路分子的Patched-1的蛋白表达水平

AHE染色显示缺血梗塞区边缘（peri-infarctedarea）

【参考文献】：
期刊论文
[1]Interaction of L-Arginine-methyl ester and Sonic hedgehog in liver ischemia-reperfusion injury in the rats[J]. Mehmet Cudi Tuncer,Hayrettin Ozturk,Huseyin Buyukbayram,Hulya Ozturk.  World Journal of Gastroenterology. 2007(28)



本文编号：3232790