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UCH-L1对恶性脑胶质瘤细胞缺氧适应性的调控研究

发布时间:2021-06-16 23:41
  目的:研究UCH-L1对恶性脑胶质瘤细胞缺氧适应性的影响并初步探讨其可能的分子机制。方法:我们使用UCH-L1siRNA靶向抑制恶性胶质瘤细胞U251和T98G中UCH-L1的表达。在缺氧环境下,1)采用划痕法、Matrigel法分别检测恶性胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力的变化;2)采用台盼蓝、克隆集落实验检测恶性胶质瘤细胞的存活和增殖能力的变化;3)采用乳酸和葡萄糖试剂盒检测恶性胶质瘤细胞糖酵解能力的变化;4)用Western Blot法检测缺氧情况下UCH-L1对凋亡相关蛋白表达和HIF-1α表达调控的影响。结果:1)划痕法和Matrigel法结果表明在缺氧环境下沉默UCH-L1后胶质瘤细胞U251和T98G的迁移能力、侵袭能力明显下降,提示UCH-L1能促进恶性胶质瘤细胞的侵袭和迁移;2)台盼蓝、克隆集落实验结果表明在缺氧环境下沉默UCH-L1后恶性胶质瘤细胞U251和T98G的存活和增殖能力明显减弱,提示UCH-L1有助于恶性胶质瘤细胞缺氧环境下的增殖和存活;3)在缺氧环境下沉默UCH-L1后恶性胶质瘤细胞相关凋亡蛋白Caspase3、PARP的表达明显增加,提示UCH-L1能抑制... 

【文章来源】:苏州大学江苏省

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
Abstract
研究背景
材料与方法
    一、 实验材料
        1 细胞株
        2 主要试剂
        3 实验仪器
        4 溶液配制
    二、 实验方法
        1 细胞培养
        2 siRNA 的设计和合成
        3 靶向 UCH-L1 siRNA:
        4 划痕法
        5 Matrigel 法
        6 台盼蓝法
        7 细胞克隆形成实验
        8 乳酸分泌量测定
        9 葡萄糖摄取量测定
        10 细胞增殖能力检测
        11 Western Blot 法检测相关蛋白的表达
        12 免疫组化检测
        13 统计学分析
实验结果
讨论
参考文献
创新点
英文缩略词表
攻读学位期间公开发表的论文
致谢



本文编号:3234010

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