Gas 6/Tyro 3/Akt信号在缺氧海马神经元损伤中的保护作用
发布时间：2021-06-23 09:41
第一部分缺氧对原代培养海马神经元凋亡及Tyro 3/Akt信号的影响目的:建立海马神经细胞原代培养模型,检测缺氧对海马神经细胞凋亡及Tyro 3/Akt信号影响,以探讨Tyro 3/Akt信号在缺氧导致海马神经细胞损伤中的作用。方法:培养原代海马神经细胞,以MAP 2免疫荧光法鉴定海马神经细胞纯度,将培养的细胞随机分为对照组、缺氧组A（缺氧12h）、缺氧组B（缺氧24h）,在倒置显微镜下观察细胞形态,以MTT法测细胞增殖活力,运用TUNEL法测细胞凋亡,采用免疫荧光法测细胞Tyro 3蛋白的表达,运用Western blot法测Akt磷酸化水平。结果:1.经MAP 2免疫荧光法鉴定,原代培养的神经细胞纯度达89%,基本达到实验所需;2.缺氧抑制神经细胞增殖活力（P<0.01）,导致细胞凋亡（P<0.01）,并呈时间依赖性（P<0.01）。3.缺氧抑制细胞Tyro 3蛋白表达（P<0.01）,降低Akt的磷酸化水平（P<0.01）,并随缺氧时间的延长呈加重的趋势。结论:缺氧具有抑制海马神经细胞增殖,促进细胞凋亡的作用,并且Tyro 3/Akt信号受抑制在缺氧...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
原代培养不同时间海马神经细胞的生长状况（×20）
MAP 2免疫荧光法鉴定原代培养的海马神经元(A:×Immunofluorescence staining for MAP 2 of hippocampal ulture (A: ×10, B: ×20)马神经细胞形态的影响缺氧对 SD 大鼠海马神经元形态的影响，本实氧后12和24小时分别观察 SD 乳鼠海马神经细：与对照组相比，缺氧12小时海马神经细胞胞断下降，细胞内容物破坏，出现空泡样变；细消失。缺氧24小时海马神经细胞减少、消失明细胞和坏死细胞遗留的轮廓。
24图1.3 缺氧时间对SD大鼠海马神经元形态影响(×20)A:正常组 B：缺氧12小时 C:缺氧24小时Fig 1.3 The morphology of cultured hippocampal neural cells in different time after anoxiaA:The normal group B：The hypoxia group A (12 hours after hypoxia) C: Thehypoxia group B (24 hours after hypoxia)3.4 缺氧对海马神经细胞增殖活力的影响为了探讨缺氧对 SD 乳鼠海马神经细胞增殖活力的影响，本实验应用MTT法观测原代培养海马神经细胞在缺氧12h 和 24h时的值。如图1.4所示：与对照组相比，缺氧组A和缺氧组B海马神经细胞活性明显降低，并在缺氧24h 时达到最低（P＜0.01），此结果提示缺氧可抑制原代培养乳鼠海马神经细胞的生长增殖活力，并且呈时间依赖性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中的作用研究[J]. 王晓天,刘晓梅,尤红娟,李小翠,秦苏萍,汤仁仙,郑葵阳. 中国医药指南. 2014(31)
[2]海马背侧注射β-淀粉样蛋白25～35激活胶质细胞和p38丝裂原活化蛋白激酶诱导神经元凋亡[J]. 王元伟,郑关毅,陈晓春,张静,黄天文,叶洪,潘晓东. 解剖学报. 2014(05)
[3]TUNEL技术在石蜡切片中的应用[J]. 李雪梅,易宗容,李德立,庞永建. 黑龙江畜牧兽医. 2013(13)
[4]受体酪氨酸蛋白激酶Tyro3在大鼠脑的表达及定位分析（英文）[J]. 赵全明,李灵敏,张策,郭睿. 北京大学学报(医学版). 2012(06)
[5]大鼠血管性痴呆模型动物中海马神经元凋亡和蛋白表达的研究[J]. 黄新武,李国春,熊玉霞,李华,张红,秦大莲. 神经解剖学杂志. 2011(03)
[6]Axl和Tyro-3受体表达受神经生长因子调控并参与PC12细胞的分化（英文）[J]. 王琦,卢清君,肖冰,郑焱,王晓民. Neuroscience Bulletin. 2011(01)
[7]不同浓度的Aβ31-35对大鼠学习记忆功能的影响[J]. 李少凤,祁金顺. 中国医疗前沿. 2011(02)
[8]脑缺血后神经细胞凋亡致血管性痴呆的研究进展[J]. 盖祥云,赵瑛,刘琳,李艳杰. 中国脑血管病杂志. 2010(11)
[9]大鼠海马神经细胞体外原代培养与鉴定[J]. 孙琪,徐志伟,敖海清,王文竹,富文俊. 中药新药与临床药理. 2010(05)
[10]一种大鼠海马神经元的原代培养方法[J]. 周明,聂菁,吕诚,胡小令. 南昌大学学报(医学版). 2010(03)
博士论文
[1]人参皂苷Rb1通过抑制缺氧诱导小胶质细胞的活化减轻SD大鼠海马神经元的缺氧损害[D]. 柯荔宁.福建医科大学 2008
硕士论文
[1]Gas6通过PI3K|Akt|FoxO3a通路在预适应中起心肌细胞保护作用[D]. 徐晓.华中科技大学 2011
[2]电针治疗对VD大鼠海马CA1区锥体细胞线粒体凋亡途径的影响[D]. 朱燕珍.福建医科大学 2007
本文编号：3244710
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
原代培养不同时间海马神经细胞的生长状况（×20）
MAP 2免疫荧光法鉴定原代培养的海马神经元(A:×Immunofluorescence staining for MAP 2 of hippocampal ulture (A: ×10, B: ×20)马神经细胞形态的影响缺氧对 SD 大鼠海马神经元形态的影响，本实氧后12和24小时分别观察 SD 乳鼠海马神经细：与对照组相比，缺氧12小时海马神经细胞胞断下降，细胞内容物破坏，出现空泡样变；细消失。缺氧24小时海马神经细胞减少、消失明细胞和坏死细胞遗留的轮廓。
24图1.3 缺氧时间对SD大鼠海马神经元形态影响(×20)A:正常组 B：缺氧12小时 C:缺氧24小时Fig 1.3 The morphology of cultured hippocampal neural cells in different time after anoxiaA:The normal group B：The hypoxia group A (12 hours after hypoxia) C: Thehypoxia group B (24 hours after hypoxia)3.4 缺氧对海马神经细胞增殖活力的影响为了探讨缺氧对 SD 乳鼠海马神经细胞增殖活力的影响，本实验应用MTT法观测原代培养海马神经细胞在缺氧12h 和 24h时的值。如图1.4所示：与对照组相比，缺氧组A和缺氧组B海马神经细胞活性明显降低，并在缺氧24h 时达到最低（P＜0.01），此结果提示缺氧可抑制原代培养乳鼠海马神经细胞的生长增殖活力，并且呈时间依赖性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中的作用研究[J]. 王晓天,刘晓梅,尤红娟,李小翠,秦苏萍,汤仁仙,郑葵阳. 中国医药指南. 2014(31)
[2]海马背侧注射β-淀粉样蛋白25～35激活胶质细胞和p38丝裂原活化蛋白激酶诱导神经元凋亡[J]. 王元伟,郑关毅,陈晓春,张静,黄天文,叶洪,潘晓东. 解剖学报. 2014(05)
[3]TUNEL技术在石蜡切片中的应用[J]. 李雪梅,易宗容,李德立,庞永建. 黑龙江畜牧兽医. 2013(13)
[4]受体酪氨酸蛋白激酶Tyro3在大鼠脑的表达及定位分析（英文）[J]. 赵全明,李灵敏,张策,郭睿. 北京大学学报(医学版). 2012(06)
[5]大鼠血管性痴呆模型动物中海马神经元凋亡和蛋白表达的研究[J]. 黄新武,李国春,熊玉霞,李华,张红,秦大莲. 神经解剖学杂志. 2011(03)
[6]Axl和Tyro-3受体表达受神经生长因子调控并参与PC12细胞的分化（英文）[J]. 王琦,卢清君,肖冰,郑焱,王晓民. Neuroscience Bulletin. 2011(01)
[7]不同浓度的Aβ31-35对大鼠学习记忆功能的影响[J]. 李少凤,祁金顺. 中国医疗前沿. 2011(02)
[8]脑缺血后神经细胞凋亡致血管性痴呆的研究进展[J]. 盖祥云,赵瑛,刘琳,李艳杰. 中国脑血管病杂志. 2010(11)
[9]大鼠海马神经细胞体外原代培养与鉴定[J]. 孙琪,徐志伟,敖海清,王文竹,富文俊. 中药新药与临床药理. 2010(05)
[10]一种大鼠海马神经元的原代培养方法[J]. 周明,聂菁,吕诚,胡小令. 南昌大学学报(医学版). 2010(03)
博士论文
[1]人参皂苷Rb1通过抑制缺氧诱导小胶质细胞的活化减轻SD大鼠海马神经元的缺氧损害[D]. 柯荔宁.福建医科大学 2008
硕士论文
[1]Gas6通过PI3K|Akt|FoxO3a通路在预适应中起心肌细胞保护作用[D]. 徐晓.华中科技大学 2011
[2]电针治疗对VD大鼠海马CA1区锥体细胞线粒体凋亡途径的影响[D]. 朱燕珍.福建医科大学 2007
本文编号：3244710
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