Wnt与NF-κB信号通路在调控LPS刺激的BV2细胞炎症的机制研究

发布时间：2021-06-26 14:07

　　[目的]研究wnt/β-catenin信号通路和NF-κB信号通路对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小胶质株BV2细胞炎症的调控机制,探讨其在神经炎症中的作用。[方法]用含有5%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）的DMEM高糖型完全培养液,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养BV2细胞。选择生长状态良好、生长密度适中的细胞,随机分为:①空白对照组（Control组）:采用5%DMEM高糖型完全培养液培养,不作任何处理;②LPS处理组（LPS组）:采用5%DMEM高糖型完全培养液培养,加入1ug/mlLPS处理细胞不同时间（0.5h、1h,2h,4h,6h）;③抑制剂组（LPS+XAV939组）:采用5%DMEM高糖型完全培养液培养,加入1mMXAV939预处理细胞6h,紧接着用1ug/mlLPS处理细胞1h。分别用RT-PCR方法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、环氧酶-2（COX-2）等炎性相关因子表达情况;用蛋白免疫印迹（Western Blotting）方法检测β-链蛋白（β-catenin）、磷酸化的核因子-κB（p-NF-κ... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?ＬＰＳ刺激ＢＶ２细胞不同时间后ＴＮＦ－ａ和ＣＯＸ－２的表达

ＬＰＳ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?ＬＰＳ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ??图２?ＬＰＳ刺激ＢＶ２细胞不同时间后ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ、ｐ－ＩｋＢ和ｐ－ＮＦ－ＫＢ的表达。图２ａ??为相应的曝光后ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果图。用ｉｍａｇｅ?Ｊ扫描条带灰度后得到相应的??强度值，用目的蛋白强度值／Ｐ－ａｃｔｉｎ的强度值来进行标准化处理。图２ｂ为??Ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ／ｐ－ａｃｔｉｎ?的强度值，图?２ｃ?为?ｐ－ＮＦ－ＫＢ／ｐ－ａｃｔｉｎ?的强度值，图?２ｄ?为??ｐ－ｌＫＢ／ｐ－ａｃｔｉｎ的强度值。每项实验均采用随机分组并重复三次以上，结果用均数??±标准误（Ｘ土Ｓ）表示。＊＊表示与空白对照组相比，尸＜０．００１，＊表示与空白对照组??相比，Ｐ＜０．０５，两组之间的差异具有统计学意义。??２８??

：??图３?ＸＡＶ９３９预处理后ＬＰＳ刺激ＢＶ２细胞产生的ＴＮＦ－ａ和ＣＯＸ－２表达水平。图??３ａ为相应的ｍＲＮＡ结果图。图３ｂ为Ｃ０Ｘ－２／ＧＡＰＤＨ的强度值，图３ｃ为??ＴＮＦ－ａ／ＧＡＰＤＨ的强度值。图３ｄ为免疫荧光结果图，红色荧光标记的蛋白为??３０??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of the Wnt/β-catenin pathway in gastric cancer: An indepth literature review[J]. Miguel Angel Chiurillo.  World Journal of Experimental Medicine. 2015(02)



本文编号：3251486