优化核酸疫苗对帕金森病小鼠炎症反应影响的实验研究
发布时间：2021-07-11 22:14
目的1.观察慢性MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的病理情况。2.评价优化核酸疫苗（pVAX1-IL-4/SYN-B）预防接种对小鼠MPTP损害的神经保护作用。3.探讨优化核酸疫苗免疫对MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的影响特点，进一步评价优化核酸疫苗预防免疫的有效性和安全性。方法抽取并制备足量pVAX1-IL-4/SYN-B和pVAX1。将C57BL/6正常小鼠随机分为正常对照组、PBS模型组、空质粒模型组、优化核酸疫苗模型组4组，分别在小鼠双后肢胫前肌肌注PBS、PBS、空质粒、pVAX1-IL-4/SYN-B各100ul进行预防免疫，共免疫3次。末次注射3周后，后3组背部皮下注射MPTP构建慢性帕金森病小鼠模型，正常对照组注射同体积的PBS。末次给药后观察小鼠行为学变化；免疫组织化学、Western blot检测小鼠黑质部TH、CD11b、 COX-2表达情况；RT-PCR检测小鼠黑质TNF-α、IL1-β炎症因子mRNA水平。结果1.在预防免疫接种阶段，未发现小鼠行为异常。但在采用MPTP构建帕金森病小鼠模型过程中，各模型组小鼠出现尾巴上翘、僵硬，肢体抖动、强直，活动减少、缓慢，...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自由活动实验测得各组小鼠行为学结果.Fig1.BehaviorresultsofeachgroupofmicewithOpen-fieldtest.
(29.00±2.34)TH 阳性细胞数较正常对照组减少了 23.68% ，差异有统计学意义(P<0.05)，但优化核酸疫苗模型组与PBS模型组、空质粒模型组比较，TH阳性细胞数明显增多，差异有统计学意义(P<0.05) (图2)。在小鼠脑切片黑质部位正常对照组几乎无CD11b、COX-2阳性细胞；PBS模型组和空质粒模型组可见较多散在或成簇分布的阳性细胞侵润，染色较深，主要见于胞浆和胞膜；而优化核酸疫苗模型组中CD11b、COX-2阳性细胞较PBS模型组和空质粒模型组明显减少，散在稀疏分布(图3、图4)。采用Image-Pro Plus软件进行图像分析测量CD11、COX-2积分光密度值(integral optical density)，优化核酸疫苗模型组与正常对照组、PBS模型组和空质粒模型组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组差异无统计学意义，(P 0.05)。
组和空质粒模型组可见较多散在或成簇分布的阳性细胞侵润，染色较深，主要见于胞浆和胞膜；而优化核酸疫苗模型组中CD11b、COX-2阳性细胞较PBS模型组和空质粒模型组明显减少，散在稀疏分布(图3、图4)。采用Image-Pro Plus软件进行图像分析测量CD11、COX-2积分光密度值(integral optical density)，优化核酸疫苗模型组与正常对照组、PBS模型组和空质粒模型组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组差异无统计学意义，(P 0.05)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗预防接种对慢性鱼藤酮损害小鼠的神经保护作用[J]. 杨旭,杨云鹏,周长青,马英,张玉平,陈中美,彭国光. 免疫学杂志. 2011(11)
[2]优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价[J]. 杨云鹏,杨旭,陈中美,彭国光,周长青,马英,张玉平,王法祥. 免疫学杂志. 2011(11)
[3]Construction and expression of nucleic acid vaccine pVAX1-h-alpha S1-140 coding human alpha-synuclein[J]. Jiacai Wang, Yingsong Ouyang, Shaojun Wang, Guoguang Peng, Qin Luo, Side Jiang, Faxiang Wang Department of Neurology (i.e., Chongqing Key Laboratory of Neurology), First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China. Neural Regeneration Research. 2008(12)
[4]核酸疫苗免疫对帕金森病小鼠的治疗作用[J]. 王少君,王加才,欧阳松应,彭国光,罗琴,涂文斌,江思德,徐芙蓉. 中国老年学杂志. 2008(19)
本文编号：3278680
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自由活动实验测得各组小鼠行为学结果.Fig1.BehaviorresultsofeachgroupofmicewithOpen-fieldtest.
(29.00±2.34)TH 阳性细胞数较正常对照组减少了 23.68% ，差异有统计学意义(P<0.05)，但优化核酸疫苗模型组与PBS模型组、空质粒模型组比较，TH阳性细胞数明显增多，差异有统计学意义(P<0.05) (图2)。在小鼠脑切片黑质部位正常对照组几乎无CD11b、COX-2阳性细胞；PBS模型组和空质粒模型组可见较多散在或成簇分布的阳性细胞侵润，染色较深，主要见于胞浆和胞膜；而优化核酸疫苗模型组中CD11b、COX-2阳性细胞较PBS模型组和空质粒模型组明显减少，散在稀疏分布(图3、图4)。采用Image-Pro Plus软件进行图像分析测量CD11、COX-2积分光密度值(integral optical density)，优化核酸疫苗模型组与正常对照组、PBS模型组和空质粒模型组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组差异无统计学意义，(P 0.05)。
组和空质粒模型组可见较多散在或成簇分布的阳性细胞侵润，染色较深，主要见于胞浆和胞膜；而优化核酸疫苗模型组中CD11b、COX-2阳性细胞较PBS模型组和空质粒模型组明显减少，散在稀疏分布(图3、图4)。采用Image-Pro Plus软件进行图像分析测量CD11、COX-2积分光密度值(integral optical density)，优化核酸疫苗模型组与正常对照组、PBS模型组和空质粒模型组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)，PBS模型组和空质粒模型组差异无统计学意义，(P 0.05)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗预防接种对慢性鱼藤酮损害小鼠的神经保护作用[J]. 杨旭,杨云鹏,周长青,马英,张玉平,陈中美,彭国光. 免疫学杂志. 2011(11)
[2]优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价[J]. 杨云鹏,杨旭,陈中美,彭国光,周长青,马英,张玉平,王法祥. 免疫学杂志. 2011(11)
[3]Construction and expression of nucleic acid vaccine pVAX1-h-alpha S1-140 coding human alpha-synuclein[J]. Jiacai Wang, Yingsong Ouyang, Shaojun Wang, Guoguang Peng, Qin Luo, Side Jiang, Faxiang Wang Department of Neurology (i.e., Chongqing Key Laboratory of Neurology), First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China. Neural Regeneration Research. 2008(12)
[4]核酸疫苗免疫对帕金森病小鼠的治疗作用[J]. 王少君,王加才,欧阳松应,彭国光,罗琴,涂文斌,江思德,徐芙蓉. 中国老年学杂志. 2008(19)
本文编号：3278680
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